ISBN 978-85-85905-10-1
Área
Físico-Química
Autores
Rodrigues Barreto, C.L. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA) ; Souza de Araújo, B. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA) ; Alves Tolentino, S.M. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA) ; Cardim de Jesus, J. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA) ; Cardozo de Souza Júnior, E. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA) ; Barreto do Nascimento, M. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA) ; Santos Pereira Flores, M. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA) ; Santos Sampaio, V. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA) ; Ferreira Bonomo, R.C. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA)
Resumo
A utilização dos SAB permite separar moléculas com atividade biológica de misturas complexas, como as proteínas, pois as fases constituídas majoritariamente por água. O artigo tem como objetivo apresentar os dados de equilíbrio do sistema formado basicamente por sulfato de sódio e polietileno-glicol 4000 nas temperaturas 20, 30, 40 e 50°C . Pode-se observar que a variação de temperatura não altera de forma significativa o comportamento das binodais, portanto a área bifásica não será reduzida.
Palavras chaves
Sistemas aquosos bifásico; binodais; efeito da temperatura
Introdução
Os Sistemas Aquosos Bifásicos (SABs) têm sido utilizadas com sucesso na extração e purificação de macromoléculas biológicas, tais como proteínas, ácidos nucleicos e antibióticos (Diamond e Hsu, 1992). Comparada a outras técnicas de purificação tradicionais, SAB tem vantagens por ter elevado teor de água em suas fases (70-90%, m/m), elevada biocompatibilidade, baixa degradação biomoléculas e baixo custo. (DIAMOND e HSU, 1992; GUNDUZ, 2000). O polietileno glicol é o polímero padrão para os sistemas bifásicos aquosos. Sua utilização torna-se vantajosa pelo seu baixo custo, propriedades físicas e químicas favoráveis, pela não diminuição da atividade das biomoléculas, além de ser biodegradável e atóxico (ZASLASVSKY, 1995). Objetivou-se fazer a determinação dos dados de equilíbrio para sistemas composto de polietileno glicol (4000 g.mol-1) + Sulfato de sódio + água, em diferentes temperaturas.
Material e métodos
Os diagramas de equilíbrio dos sistemas aquosos bifásicos contendo PEG (4000 g/mol) + sal (sulfato de zinco) + água foram obtidos nas temperaturas de (20, 30, 40 e 50ºC).As curvas binodais para esse sistema foram obtidas mediante a técnica turbidimétrica, segundo metodologia de Albertsson (1986), nas temperaturas de estudo. Soluções aquosas estoque de PEG (50% em massa), do sal (25% em massa) foram utilizadas no experimento. Quantidades adequadas de PEG, sal e água, foram pesadasem balança analítica. O tubo contendo a solução foi levado a um banho termostático, onde foi deixado por 2 minutos para atingir o equilíbrio térmico nas temperaturas desejadas. Em seguida, foram adicionadas alíquotas da solução estoque de sal com uma pipeta automática, mantendo-se a agitação manual do tubo dentro do banho, até que o sistema se turvasse. O aparecimento da turbidez indica que o sistema passou de monofásico para bifásico. Obtinha-se, com isso, o primeiro ponto da curva binodal. Os pontos adicionais foram obtidos pela adição de pequenas quantidades de água para que o sistema ficasse homogêneo (límpido) e, na sequência, sal até promover uma nova turvação. O processo foi repetido até se obterem os pontos suficientes para a construção da curva. As massas foram cuidadosamente anotadas para que possa ser realizado o balanço de massa das fases e dos componentes do sistema.
Resultado e discussão
As composições de equilíbrio dos SAB’s compostos por PEG 4000 + sulfato de zinco +
água, em diferentes temperaturas, estão apresentadas na Figura 1.
O aumento da temperatura provoca diminuição da solubilidade mútua, ou seja,
aumento da região bifásica. Analisando o comportamento do sistema formado por PEG
4000 + sulfato de zinco + água, em diferentes temperaturas (20, 30, 30 e 50°C),
notou-se um pequeno aumento da região bifásica com o aumento da temperatura, sendo
mais evidente quando comparado as binodais de 20°C e 50°C, nas demais temperaturas
não foi possível observar um deslocamento significativo das binodais, corroborando
com estudos de ZAFARANIMOATTAR & GASEMI, (2002).
Binodal do PEG 4000+ Sulfato de zinco nas temperaturas de 20ºC, 30ºC, 40ºC e 50ºC.
Conclusões
Com base nos resultados apresentados, pode-se concluir pode-se que o comportamento destes SAB’s não é significativamente influenciado pela variação da temperatura na faixa estudada.
Agradecimentos
Referências
1.DIAMOND, A. D., Hsu, J. T. (1992), Aqueoustwophase systems for biomoleculeseparation. Advances in BiochemistryEngineering. v. 47, 89-135.
2. ALBERTSSON, P.A., Partition of Cell Particles and Macromolecules, third ed., Wiley, New York, 1986.
3.GUNDUZ, U. (2001), Optimizationofbovineserumalbuminpartitioncoefficient in aqueoustwo-phasesystems.Bioseparation 9: 277-281.
4. ZASLASVSKY, B. Y. (1995), Aqueoustwo-phasepartitioning-PhysicalChemistryandBioanalyticalApplications, Mercel Dekker, Inc. New York. 3.P.A. Albertsson, Partition of Cell Particles and Macromolecules, third ed., Wiley, New York, 1986.
ZAFARANI-MOATTAR, M. T.; GASEMI, J. Liquid-liquid equilibria of aqueous two-phase
systems containing polyethylene glycol and ammonium dihydrogen phosphate or diammonium hydrogen phosphate. Experiment and correlation. Fluid Phase Equilibria, v.198, p. 281–291, 2002.
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