ISBN 978-85-85905-15-6
Área
Química Orgânica
Autores
de Sousa Amorim, W. (UFPA) ; da Cunha Borges, L. (UFPA) ; do Carmo Diniz Sampaio, G. (UFPA) ; das Graças Santa Rosa Pamplona, S. (UFPA) ; Nascimento da Silva, M. (UFPA)
Resumo
Considerando as atividades presente na espécie Swietenia macrophylla, o projeto propôs realizar um estudo fitoquímico das folhas da planta. A coleta foi realizada em São Francisco do Pará, o material foi seco, triturado, macerado com hexano em duas bateladas de 24 horas, concentrado em evaporador rotativo e submetido à Cromatografia em Coluna de sílica por via úmida do extrato hexânico. Através de HPLC analítico identificou-se a fração rica em limonoides, a qual foi usada para realizar os testes de atividade biológica. Para a mesma iniciou-se o desenvolvimento do método para isolamento das substancias, utilizando técnicas cromatográficas de alta eficiência, as substancias L1, L2, L3, L4 foram isoladas, suas estrutura foram elucidadas através de técnicas espectrométricas uni e bidimensionais
Palavras chaves
Meliaceae; Limonoides; HPLC
Introdução
A espécie S. macrophylla, conhecida popularmente como mogno é uma das mais importantes para o mercado madeireiro mundial(LENTINI, 2005). A família Meliaceae é caracterizada pela presença de substâncias conhecidas como limonoides, metabólitos que apresentam uma gama de atividades biológicas, principalmente inseticidas. A espécie S. macrophylla fornece madeira nobre e seu cultivo tem sido prejudicado em consequência do ataque de um microlepdóptero– Hypsipylla grandella às folhas jovens desta planta, as larvas de H. grandella penetram no broto apical provocando sua morte. No entanto, sabe-se que as folhas do mogno, quando amadurecida apresentam defesa à esta praga.Com isso os objetivos do trabalho são: Obter massas suficientes das substâncias da classe dos limonoides, a partir do extrato hexânico das folhas de S. macrophylla, Isolar e identificar os limonoides presentes no extrato hexânico das folhas de S.macrophylla, utilizando técnicas cromatográficas clássicas e de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência no modo preparativo e avaliar a atividade biológica das frações obtidas de S. macrophylla. Considerando a justificativa em questão, o Laboratório de Cromatografia Líquida em conjunto com o Laboratório de Neurociências da Universidade Federal do Pará, buscam moléculas com potencial uso para a produção de drogas com potencial atividade antitumoral.
Material e métodos
Os materiais utilizado foram: •Balança analítica SHIMADZU, AY220; •Becker, Erlermeyer, Pipeta; •Percolador; •Evaporador Rotativo; •Solventes TEDIA: Hexano, Metanol, Acetonitrila e Tetrahidrofurano, todos ACS; •Papel de filtro analítico; •Cromatógrafo Líquido Shimadzu LC-20 (analítico) e LC-6 (preparativo). PREPARO DO EXTRATO HEXÂNICO As folhas foram coletadas em São Francisco do Pará. As mesmas foram colocadas para secar em estufa de circulação de ar a 45ºC por cinco dias, em seguida foram trituradas em um liquidificador, totalizando 2,7 Kg de material botânico seco e triturado. Em seguida foi colocado o material seco e moído no percolador por 24 horas, submetido a duas extrações, por maceração, com hexano seguido de filtração e evaporação do solvente em evaporador rotativo. Obteve-se 72,6 g de extrato hexânico bruto. A partir desse extrato foram isolados os limonóides, utilizando o método de isolamento por cromatografia em coluna via úmida e assim obtida a fração rica em limonóides, a qual foi usada para realizar os testes de atividade biológica. Para o isolamento das substâncias, foram pesados 72,4 g do extrato hexânico e submetida ao fracionamento por cromatografia em coluna de sílica gel. A fase móvel foi constituída por hexano, acetato de etila e metanol, empregados em modo crescente de polaridade. As frações 3, 4 e 5 foram analisadas por HPLC e a fração escolhida para dar prosseguimento ao trabalho foi a fração AcOEt 100%, devido a presença dos limonóides de interesse. A fração AcOEt 100%, foi submetida a um refracionamento por CCVU usando hexano e acetato de etila como eluentes e deste processo obteve-se 28 subfrações. Foram feitas analises por HPLC analítico nas subfrações 18 a 29,para dar inicio ao desenvolvimento do método de isolamento das substancias.
Resultado e discussão
O isolamento de substancias com uma alta qualidade e pureza é difícil e é necessário um tempo maior e gasta-se mais solvente. Com isso a otimização do método se mostrou necessário, visto que, os resultados experimentais precisam de tempo e de recursos para serem alcançados, levando em consideração as informações obtidas na literatura. Na investigação química das folhas de Swietenia macrophylla foram isoladas quatro substâncias, sendo que as mesmas já são conhecidas. As substancias L1, L2, L3 e L4 foram isoladas e tiveram suas estruturas elucidadas através de técnicas espectrométricas uni e bidimensionais.
H2O:ACN 40:60 , Shim-pack (250 x 21,2 mm, 5 μm, 110 Å), comp. de onda 215 nm.
H2O:ACN 40:60 , Shim-pack (250 x 21,2 mm, 5 μm, 110 Å), comp. de onda 215 nm
Conclusões
O extrato hexânico contém as substâncias de interesse (limonóides) que são o objeto de estudo deste trabalho, o objetivo do mesmo de isolar em maior quantidade os limonóides já conhecidos foi alcançado.
Agradecimentos
Ao CNPq pelo suporte financeiro.
Referências
DA SILVA, M. N. Estudo Fitoquímico de Swietenia macrophylla: Uma contribuição ao controle da broca do mogno. Tese de Doutorado - UFSCar, p. 11, 2005.
BANERJI, B., NIGAN, S.K. Woods constituents of meliaceae: a review. Fitoterapia, 55(1), 3-36, 1984.
BEGLEY, S.The cancer killer . Newsweek, Dec 23, 42-47; 1996.
CHATONET, J. As plantas medicinais: preparo e utilização. Rio de Janeiro, Martins Fontes; 175p, 1979.
Guevara A.P, Apilado A, Sakurai H, Kozuka M, Tokuda H. Anti-inflamatory, Antimutagenicity and Antitumor-promoting Activities of Mahogany Seeds, Swietenia macrophylla (Meliaceae). 1996; PJS, 125(4).
LENTINI, M., VERÍSSIMO, A., PEREIRA, D, O estado da Amazônia. Instituto do Homem e Meio Ambiente da Amazônia – Imazom, no 02, 2005.
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