ESTUDO FARMACOGNÓSTICO DAS FOLHAS DE KALANCHOE PINNATA

ISBN 978-85-85905-21-7

Área

Produtos Naturais

Autores

Cavalcante, M.C. (UFOPA) ; Júnior, L.A.P.S. (UFOPA) ; Santos, E.A.S. (UFOPA) ; Miranda, I.S. (UFOPA) ; Filho, M.B.S. (UFOPA) ; Soares, A.M.S. (UFOPA)

Resumo

Para utilizarmos os fitoterápicos na prevenção e/ou cura de doenças são necessários estudos prévios relativos a aspectos botânicos, farmacognósticos, fitoquímicos, farmacológicos e toxicológicos. Crassulaceae apresenta interesse para estudos pois atende às diversas abordagens de estudos de prospecção (etológica, quimiotaxonômica e etnodirigida. Visou-se à caracterização físico- química e fitoquímica preliminar de Kalanchoe pinnata para contribuir com sua identificação e parâmetros de qualidade da espécie. Na triagem fitoquímica e identificou-se glicosídeos cardiotônicos, flavonoides, saponinas e fenóis e taninos. A caracterização físico-química auxiliou na determinação dos parâmetros de qualidade para a droga vegetal.

Palavras chaves

Kalanchoe pinnata; caracterização; fitoquimica

Introdução

Por um longo período de tempo, plantas têm sido uma das fontes de produtos naturais para a manutenção da saúde humana. As mais diversas enfermidades têm sido tratadas com chás (infuso, decocto, macerados), sucos, tinturas, banhos, cataplasmas e ungüentos, preparados a partir de parte das plantas. A referida conduta terapêutica remonta, principalmente, aos antigos povos da China, Egito, Ásia e Roma, em que os eruditos, com base em seus conhecimentos, classificaram numerosas espécies vegetais, com a respectiva indicação do uso medicinal. (FERNANDEZ et al., 1982; ROBERTS et al., 1997). Todavia, deve-se garantir que a droga vegetal a ser utilizada corresponde a um material de qualidade e que seu uso será seguro e eficaz. Para tanto, deve-se realizar a caracterização da matéria-prima vegetal por meio de técnicas de caracterização físico-química. Tais parâmetros são importantes para avaliar se a droga vegetal obtida tem qualidade e se deve seguir o processo produtivo. Logo, diversos estudos devem avaliar todas essas características de modo a contribuir para um consenso quanto aos parâmetros e perfis de qualidade para uma determinada espécie vegetal. Além disso, a presença dos metabólitos secundários responsáveis pela atividade deve ser averiguada. Quando não se tem conhecimento de quais são esses metabólitos, deve-se realizar uma triagem fitoquímica preliminar, podendo-se determinar quais classes de metabólitos estão presentes, como alcaloides, flavonóides, taninos, antraquinonas, saponinas, dentre outros. Buscou-se determinar os parâmetros físico- químicos da espécie Kalanchoe pinnata, bem como os seus perfis fitoquímicos, visando a contribuir para o estabelecimento de parâmetros de controle de qualidade para esta espécie vegetal.

Material e métodos

Obtenção do material vegetal: Folhas de K. pinnata foram coletadas e lavadas em solução de hipoclorito de sódio (0,2%) e água destilada na sequência. Posteriormente as folhas foram conduzidas à secagem em estufa de circulação de ar a 40°C, seguido de trituração. Abordagem Fitoquímica: O extrato foi submetido a uma investigação dos constituintes químicos por classe metabólica, no qual é utilizada para se determinar quais metabólitos secundários estão presentes na droga vegetal. Os testes foram realizados seguindo-se a metodologia proposta por Costa (2001). Através da metodologia citada foram extraídos saponinas, flavonoides, purinas, fenóis e taninos e Glicosideos cardiotônicos. Granulometria: Baseado na Farmacopéia Brasileira (1988), 25 g do material vegetal pulverizado foram submetidos à passagem forçada por vibração, através de tamises com abertura de malhas e coletor correspondentes a 0,125; 0,18; 0,25; 0,5 e 0,85 mm, utilizando tamisador vibratório, na escala oito do aparelho, durante 30 minutos. Após este processo, as frações foram retiradas dos tamises e do coletor e quantificadas quanto às suas proporções. Determinação do teor de extrativos: De acordo com a metodologia de DEUTSCHES ARZNEIBUCH, 1994, para tanto utilizou-se a equação 01:TE= (g*FD*100)/m (01). Em que: TE = teor de extrativos (%); g = massa do resíduo seco (g); m = massa da amostra (g); FD = fator de diluição. Determinação do pH: Foi preparada uma solução a 1% por infusão com a droga vegetal. Em erlenmeyer, 99 g de água foram colocados sobre uma chapa- elétrica para ebulir durante 5 minutos. Em seguida, a água foi vertida sobre a droga e o recipiente foi fechado e deixado em infusão por 15 minutos. Após este tempo, a mistura foi filtrada e arrefecida, procedendo-se à leitura em peagômetro calibrado em pH de 4 a 9(FARMACOPEIA BRASILEIRA, 1988). Determinação da densidade aparente não compactada: Uma proveta de 100 mL foi previamente pesada e, posteriormente, preenchida com a droga vegetal. A densidade aparente foi determinada com os dados de volume e massa, de acordo com os seguintes cálculos (equação 02):Dap=(Mpc-Mpv)/Vp (02) Em que: Dap=densidade aparente; Mpv = massa da proveta vazia; Mpc = massa da proveta cheia; Vp = volume da proveta. Perda por dessecação em estufa: Foram pesados 2 g da droga e colocados em “pesa- filtros” previamente tarados. Em seguida, foram levados até estufa a 105 ºC por duas horas. Após esse tempo, os “pesa filtros” foram mantidos em dessecador por mais 30 minutos, e então, pesados. Em seguida foram colocados normalmente em estufa, repetindo o procedimento, até obtenção de massa constante (FARMACOPÉIA BRASILEIRA, 1988). Determinação do resíduo sólido do vegetal fresco: Três amostras de 10,00g de folhas frescas de cada espécie vegetal foram colocadas em estufa com circulação de ar a 40°C. A massa foi medida diariamente até obtenção de valores constantes. Os resultados foram expressos em porcentagem (FARMACOPEIA, 1997).

Resultado e discussão

ANÁLISES FITOQUÍMICAS Triagem fitoquímica das principais classes de metabólitos secundários Os processos de prospecção fitoquímica são de extrema importância, pois permitem identificar quais classes de metabólitos secundários e/ou princípios ativos estão presentes em determinada amostra vegetal e, a partir daí, orientar a extração e/ou fracionamento de extratos para isolamento de compostos de maior interesse. Muitas substâncias, quando tratadas com determinados reativos, apresentam reações de coloração e/ou precipitação características, que permitem a identificação das amostras que as contêm. As plantas produzem diferentes substâncias químicas e o fazem em diferentes proporções, dependendo do hábitat, do regime de chuvas, da insolação, do solo, enfim, das características climato- edáficas. Entretanto, algumas substâncias químicas são bastantes características para um determinado vegetal, e desta forma podem servir como parâmetro para sua caracterização e identificação. No caso das folhas pulverizadas de Kalanchoe pinnata, ficou bem evidente a partir da triagem fitoquímica, a presença de fenóis e taninos, as saponinas, os flavonoides e os Glicosídeos cardiotônicos (Tabela 01), como grupos de substâncias químicas que podem ser empregadas para a caracterização da matéria-prima. Vale ressaltar que para que fique caracterizada a presença de determinado grupo de substância química na amostra, todos os testes executados devem ser positivos. Deve-se fazer a ressalva de que os glicosídeos cardiotônicos geralmente possuem índice terapêutico bastante baixo, tendo potencial como agente tóxico fatal. Por essa razão, a utilização desta planta na medicina popular não deve ser indicada antes que sejam realizados testes toxicológicos que garantam sua segurança ou, ainda, que tais compostos sejam isolados e não façam parte do conjunto de substâncias a serem utilizadas pelo indivíduo, sendo que este processo deve ser realizado por profissionais capacitados. Determinação das características físico-químicas do pó das folhas: O tamanho médio de partícula (granulometria), é o grau de divisão de pós, é expressa em referência à abertura nominal da malha do tamis utilizado (FARMACOPÉIA, 1988). Segundo a literatura (LIST e SCHMIDT, 2000), a droga pulverizada que apresente partículas de tamanho superior à classificação de fino é mais adequada para os processos de extração. Por essa razão, é importante conhecer a distribuição do tamanho de partículas e não somente seu tamanho médio. O resíduo sólido do vegetal fresco indica haver grande quantidade de água no vegetal (cerca de 88,33%). Por isso, é importante observar que as folhas destas espécies devem ser submetidas à secagem o quanto antes, considerando- se o momento da colheita, garantindo assim a pronta estabilização de possíveis reações de degradação metabólica dos princípios ativos. Contudo, essa secagem não deve ser efetuada em temperaturas elevadas por não se conhecer a termo labilidade dos metabólitos secundários. Sugere-se, portanto, o uso de estufas com circulação de ar, pois nestas o ar saturado é constantemente insuflado para o exterior da câmara de secagem, acelerando o processo. Outro parâmetro que auxilia a caracterização da droga é representado pela perda por dessecação, que está ligada à estabilidade microbiológica da droga, como expressão de sua susceptibilidade ao desenvolvimento de bactérias e fungos, e estabilidade química, representada especialmente pelos processos de hidrólise (WHO, 1992). A variabilidade nos valores pode ser reduzida, desde que haja padronização nos parâmetros de plantio, coleta, armazenagem e tratamento prévio da droga utilizada. A perda por dessecação pode fornecer dados acerca do rendimento de extração, já que a secagem influi no estado de integridade das estruturas celulares, expondo-as mais ou menos ao contato com solventes (HARBORNE, 1993). Além do mais, sob o ponto de vista tecnológico e de produção, é importante conhecer quantitativamente o conteúdo de água presente na matéria- prima vegetal, para que este valor seja considerado nos cálculos de rendimento. A determinação da perda por dessecação mostrou que a droga vegetal apresenta valores dentro dos parâmetros com relação à umidade, que deve variar de 8 a 14%, com relação à maioria das drogas vegetais constituídas de sumidades floridas (FARMACOPÉIA, 2000). A importância do pH nos vegetais está ligada ao mecanismo de formação de ATP, que é impulsionado por uma força próton-motriz durante a fotofosforilação nos cloroplastos (STRAYER, 1996). As alterações metabólicas provocadas por reações de óxido-redução podem modificar o pH das células vegetais, promovendo desvio das rotas metabólicas normais (STRAYER, 1996). O ensaio do teor de extrativos (TE) indica a quantidade de substâncias extraíveis, ou seja, solúveis em determinado sistema solvente. Neste estudo, o teor de extrativos da droga vegetal foi empregado exclusivamente como um ensaio auxiliar na caracterização físico- química, visto que se trata de um parâmetro importante no controle de qualidade da matéria-prima vegetal. O valor de TE encontrado para a droga vegetal em estudo foi de 70 % (m/m).

Tabela 01: Triagem fitoquimica das folhas de Kalanchoe pinnata


Tabela 02: Resumo da análise da droga K. pinnata

Conclusões

Os testes de caracterização físico-química contribuíram para a identidade e qualidade do material utilizado para a preparação da droga vegetal. Para isso, deve-se estudar espécies coletadas em diversas épocas do ano e locais de cultivo para que todas as variações relacionadas à aclimatação e à sazonalidade sejam consideradas quando da construção da pesquisa. Os testes químicos evidenciaram a ocorrência de diversas classes de metabólitos secundários, as quais já foram estudadas e demonstraram possuir efeitos biológicos de interesse, justificando o estudo de novas ações farmacológicas para essas espécies vegetais. A presença de glicosídeos cardiotônicos deve ser vista com cautela já que pode ser um indício de toxicidade por parte de K. pinnata. Por isso, sugere-se a realização de estudos de identificação e isolamento desses compostos, os quais podem ser estudados para utilização em indivíduos com insuficiência cardíaca.

Agradecimentos

Agradeço a Adriele pela orientação e a UFOPA pelo espaço cedido e auxilio.

Referências

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