Caracterização química de extratos etanólicos de Caryocar coriaceum Wittm (Pequi) e atividade anticolinesterasica

ISBN 978-85-85905-23-1

Área

Produtos Naturais

Autores

Maia de Morais, S. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CEARÁ) ; Carolina Silva e Silva, A. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CEARÁ) ; Lima dos Santos, D. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CEARÁ) ; Lima Maciel, G. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CEARÁ) ; Ribeiro Alves, D. (UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CEARÁ)

Resumo

O Caryocar coriaceum, popularmente conhecido como pequi, destaca-se por constituir uma alternativa viável de fitoterápico com potencial valor econômico, uma vez que todas as partes da planta são utilizadas pela população local. Extratos etanólicos da polpa e casca do fruto bem como das folhas foram submetidos à caracterização fitoquimica, quantificação de fenóis e flavonoides, espectroscopia na região do infravermelho e determinação de atividade antiacetilcolinesterase. Na prospecção fitoquímica apresentaram-se alcaloides, catequinas, esteroides, fenóis, flavonoides, saponinas e taninos, apresentando valores relevantes quanto às quantificações de fenóis e flavonoides. Os extratos revelaram importante atividade antiacetilcolinestrese, revelando potencial ação contra a Doença de Alzheimer.

Palavras chaves

Pequi; Antiacetilcolinesterase; FTIR

Introdução

O cerrado abrange cerca de 23,92 % da área total do Brasil, aproximadamente 2.036.448 Km² (IBGE, 2004), atualmente sua área foi reduzida em 986.247 Km2 devido ao processo de fragmentação das vegetações, desencadeando na perda de habitats e de biodiversidade e reduzindo o tamanho das populações, especialmente das de espécies raras, (IBGE, 2008). É um bioma estratégico que interliga o pantanal, a floresta amazônica e a caatinga de forma direta, sendo também responsável por garantir o equilíbrio ecológico e a diversidade biológica destes biomas (Nascimento, 2007). Mais de 100 espécies são utilizadas pela comunidade para fins medicinais, com o intuito de tratar doenças (AGUIAR, L.C.G.G.; BARROS, R.F.M, 2012). O popularmente conhecido pequi (Caryocar coriaceum Wittm), predominante no cerrado (CAMARGO et al, 2014), é utilizado pela população, salientando suas diversas aplicações como antileishmanial, fungicida, antioxidantes, biodiesel, aplicações em emulsões cosméticas, entre outras (TOMIOTTO- PELLISSIER et al, 2018; ALVES et al, 2017; PORTO, 2008; BREDA, 2015; CAMARGO et al, 2014; SILVA et al, 2014). Pesquisas vem avaliando a ação de produtos naturais na inibição da enzima acetilcolinesterase (AChE) (PENIDO, 2017; MARTINS, 2018; ZANARDI, 2012; MOTA, 2008). Responsável por hidrolisar o neurotransmissor acetilcolina possibilitando a conclusão do impulso nervoso, pacientes diagnosticados possuem uma elevada concentração desta enzima (MOTA, 2012). Neste trabalho, objetivou-se a caracterização química, a elucidação de classes de compostos por espectroscopia na região do infravermelho (FT-IR) e a determinação de atividade inibitória frente à enzima AChE dos seguintes extratos: Extratos etanolicos da casca (EECP), polpa (EEPP) e folha (EEFP).

Material e métodos

Produtos químicos: iodeto de acetilcolina (ATCI), e outros reagentes foram adquiridos da Sigma ChemicalCo (St. Louis, MO, EUA). A polpa, as folhas, os frutos maduros e as cascas de C. coriaceum foram obtidos no campus da Universidade Estadual do Ceará (lat.:−3.792222; long: −38.556111), Fortaleza, Brasil. Foram identificadas pelo Herbário Prisco Bezerra sob o código EAC57060. Os extratos foram obtidos por maceração a frio com 96% de etanol, a 12 h de ciclo de luz, sem agitação por 7 dias. A filtração e a evaporação do solvente a pressão reduzida em evaporador rotativo levaram a extratos etanólicos brutos da folha, polpa e casca do fruto. A presença de metabólitos secundários foi detectada através da observação de mudanças de cor ou reações de formação de precipitados (PENIDO et al, 2017). O teor total de fenois foi determinado quantitativamente utilizando o Método de Folin – Ciocalteu (SOUSA et al, 2007). O teor de flavonoides foi determinado pelo método de Funari e Ferro (2006). Os espectros FT-IR foram obtidos utilizando um espectrofotômetro modelo Nicolet iS5 da Thermo Scientific. As amostras foram preparadas na forma de pastilhas de KBr na proporção 1:20 (m/m) e os espectros registrados no intervalo de 4000 a 400 cm-1, empregando-se 32 scans e resolução de 4 cm-1. A atividade de AChE medido quantitativamente usando um leitor de microplacas Elisa BIOTEK (modelo ELX 800 com software Gen5 V2.04.11), baseado no método de Ellman (1961) e modificado por Trevisan (2003).

Resultado e discussão

A prospecção fitoquímica dos extratos de pequi demonstrou a presença de alcaloides, catequinas, esteroides, fenóis, flavonoides, saponinas e taninos. Em relação às quantificações o extrato EEFP demostrou expressiva presença de fenóis, em contrapartida EECP exibiu maior teor de flavonoides. O extrato EEPP apresentou melhor atividade anticolinesterásica, quando comparada ao padrão Eserina, como visualizado na tabela 01, outros trabalhos indicam que todos os extratos apresentaram valores de inibição relevantes (BENIDO et al, 2017), referenciando o C. coriaceum como potencial fonte de compostos bioativos contra a Doença de Alzheimer. Os espectros FT-IR foram identificados tendo como referência os trabalhos Amorim (2016), Breda (2015; 2017), Ragavendran (2011), Geocze (2011) e Pavia (2010), que determinaram a presença de: estiramento axial de OH dos ácidos orgânicos com banda larga (3410–2500 cm-1); estiramento C-H (2925cm-1); estiramento C=O de ácidos carboxílicos (1707cm-1); vibração CO de aminoácidos (1611cm-1); deformação angular CH2 (1448cm-1); estiramento de ligação C-O (1196, 1034 e 1055 cm-1), conforme visualizado na Figura 1.

Espectros no infravermelho em espectroscópio modelo Nicolet iS5 da Thermo Scientific dos extratos de partes da planta Caryocar coriaceum.


Teor de fenóis e flavonoides totais e inibição da atividade da enzima AChE (IC50) no extrato etanolico de C. coriaceum.

Conclusões

Os resultados obtidos neste trabalho têm como intenção referenciar o C. coriaceum como potencial fonte de compostos bioativos contra a doença de Alzheimer, visto seus teores relevantes de fenóis e flavonoides, a presença de alcaloides entre os outros metabolitos que podem estar relacionados a alta atividade antiacetilcolinesterase. Logo, faz-se necessário um estudo para o isolamento e caracterização de substâncias, assim como também, estudos in vivo devem ser realizados para detectar a biodisponibilidade desses extratos, visando o desenvolvimento de novos produtos farmacêuticos.

Agradecimentos

Agradeço à Profa. Selene, pela orientação e disponibilidade. UECE, CNPQ e CAPES.

Referências

AGUIAR, L. C. G. G.; BARROS, R. F. M. Medicinal plants cultivated in homegardens of rural communities in the domain of Cerrado in Piaui (Demerval Lobão Municipality, Piauí State, Brazil). Revista Brasileira de Plantas Medicinais, v. 14, n. 3, p. 419-434, 2012.

ALVES, DANIELA RIBEIRO et al. Flavonoid composition and biological activities of ethanol extracts of Caryocar coriaceum Wittm., a native plant from Caatinga Biome. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2017.

AMORIM, DAYANE J. et al. Characterization of Pequi (Caryocar brasiliense) Shells and Evaluation of Their Potential for the Adsorption of PbIIIons in Aqueous Systems. Journal of the Brazilian Chemical Society, v. 27, n. 3, p. 616-623, 2016.

BREDA, CAROLINE ALVES et al. Emprego de extratos de folhas e resíduos de espécies frutíferas do cerrado como fungicidas naturais em filmes e revestimentos comestíveis. 2015.

BREDA, CAROLINE ALVES et al. Processing and characterization of chitosan films with incorporation of ethanolic extract from “pequi” peels. Macromolecular Research, v. 25, n. 11, p. 1049-1056, 2017.

CAMARGO, MARIELE PASUCH et al. A cultura do pequi (Caryocar brasiliense camb.) na recuperação de áreas degradas e como alternativa para a produção de biodiesel no Brasil. Journal of Agronomic Sciences, Umuarama, v.3, n. especial, p.180-192, 2014.

ELLMAN, GEORGE L. et al. A new and rapid colorimetric determination of acetylcholinesterase activity. Biochemical pharmacology, v. 7, n. 2, p. 88-95, 1961.

FUNARI, CRISTIANO S.; FERRO, VICENTE O. Análise de própolis. Ciência e Tecnologia de Alimentos, v. 26, n. 1, p. 171-178, 2006.

GEŐCZE, K. C. Análise exploratória de carotenóides, óleos essenciais e triacilglicerídios do pequi (Caryocar brasiliense Camb.) de municípios brasileiros situados no bioma cerrado. Tese de Doutorado. Tese apresentada à Universidade Federal de Viçosa, Viçosa 2011.

KLINK, CARLOS A.; MACHADO, RICARDO B. A. conservação do cerrado brasileiro. megadiversidade, v. 1, n. 1, p. 147-155, 2005.

IBGE, Mapa de Biomas e de Vegetação 2004. Disponível em: <https:// ww2.ibge.gov .br/home/presidencia /noticias/21052004biomashtml.shtm> Acesso em: 31 de julho de 2018.

IBGE, Indicadores de Desenvolvimento sustentável 2008. Disponível em: < https:// sidra.ibge .gov.br/Tabela/603> Acesso em: 31 de julho de 2018.

NASCIMENTO J. B. Cerrado: Nosso bioma, nossa riqueza. 1ª ed. Palmas: Kelps; 2007
PAVIA, DONALD L. et al. Introdução a Espectroscopia. 4. Ed. Washington: Cengage, 2010.

PENIDO, A. B., et al. Medicinal plants from northeastern Brazil against Alzheimer’s disease. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2017.

PORTO, C. DA S. Potencial antioxidante de extratos obtidos a partir de frutos e folhas do pequi (Caryocar brasiliense camb.) Dissertação apresentada ao Programa de Pós graduação em Ciências Biológicas da Universidade Estadual de Montes Claros, Minas Gerais, 2008.

RAGAVENDRAN, P. et al. functional group analysis of various extracts of Aerva lanata (L.,) by ftir spectrum. Pharmacologyonline, v. 1, p. 358-364, 2011.

SILVA, MARIA DO SOCORRO SOUSA et al. Alcaloides de plantas da familia Amaryllidaceae: isolamento, caracterização e testes de inibição de Acetilcolinesterase. 2009.

SILVA, TIAGO ALMEIDA et al. Methylic and ethylic biodiesels from pequi oil (Caryocar brasiliense Camb.): Production and thermogravimetric studies. Fuel, v. 136, p. 10-18, 2014.

SOUSA, CM DE M. et al. Fenóis totais e atividade antioxidante de cinco plantas medicinais. Química nova, v. 30, n. 2, p. 351-355, 2007.

TOMIOTTO-PELLISSIER, FERNANDA et al. Caryocar coriaceum extracts exert leishmanicidal effect acting in promastigote forms by apoptosis-like mechanism and intracellular amastigotes by Nrf2/HO-1/ferritin dependent response and iron depletion. BIOMEDICINE & PHARMACOTHERAPY , v. 98, p. 662-672, 2018.

MARTINS, GIULVELINE VERAS et al. Estudo químico e avaliação das atividades antioxidante, anti-acetilcolinesterase e anti-leishmanial de extratos de Jatropha gossypifolia L.(Pião roxo). Revista Virtual de Química, v. 10, n. 1, 2018.

M. T. TREVISAN, F. V. MACEDO, M. VAN DE MEENT, I. K. RHEE, AND R. VERPOORTE, “Seleção de plantas com atividade anticolinasterase para tratamento da doença de Alzheimer,” Química Nova, vol. 26, no. 3, pp. 301–304, 2003.
MOTA, W. M. et al. Avaliação da inibição da acetilcolinesterase por extratos de plantas medicinais. Revista Brasileira de Plantas Medicinais, v. 14, n. 4, p. 624-628, 2012.

VILA-NOVA, NADJA S. et al. Leishmanicidal and cholinesterase inhibiting activities of phenolic compounds of Dimorphandra gardneriana and Platymiscium floribundum, native plants from Caatinga biome. Pesquisa Veterinária Brasileira, v. 32, n. 11, p. 1164-1168, 2012.

ZANARDI, LISINÉIA M. et al. sesquiterpenos produzidos pelo fungo endofítico phomopsis cassiae com atividade antifúngica e inibidora de acetilcolinesterase. Química Nova, p. 2233-2236, 2012.