ÁREA: Química Orgânica
TÍTULO: Síntese e atividade citotóxica do derivado 5-(10-cloro-antraceno-9-il-metileno)-3-[2-oxo-2-(3-oxo-3,4-diidro-2H-benzol[1,4]oxazin-6-il)-etil]-tiazolidina-2,4-diona
AUTORES: SILVA, I. M. (UFPE) ; ALBUQUERQUE, J. F. C. (UFPE) ; FILHO, J. S. (UFPE) ; EGITO, M. S. (UFPE) ; RODRIGUES, M. D. (UFPE) ; NASCIMENTO, S. C. (UFPE)
RESUMO: O câncer tem atingindo milhões de pessoas em todo o mundo. Os derivados tiazolidínicos apresentam diversas atividades biológicas conhecidas. Objetivando promover a síntese e avaliação citotóxica do 5-(10-cloro-antraceno-9-il-metileno)-3-[2-oxo-2-(3-oxo-3,4-diidro-2H-benzol[1,4]oxazin-6-il)-etil]-tiazolidina-2,4-diona) (III) frente as linhagens de células Hep-2 (carcinoma epidermóide de laringe) e NCI-H292 (carcinoma mucoepidermóide de pulmão humano), o composto (III) foi obtido pela condensação de Knoevenagel do composto 3-[2-oxo-2-(3-oxo-3,4-diidro-2H-benzo[1,4]oxazin-6-il)-etil]-tiazolidina-2,4-diona (I) com o 10-cloro-9-formil-antraceno (II) sua atividade citotóxica foi determinada pelo método MTT. Esse derivado apresentou moderada atividade frente às duas linhagens de células testadas.
PALAVRAS CHAVES: tiazolidinona, tiazolidina-2,4-diona; atividade citotócica
INTRODUÇÃO: O câncer é uma doença de células, geralmente causadas por mutação ou por ativação anormal de genes (oncogenes) que controlam o crescimento e a mitose celular (GUYTON 1991) Mais de 11 milhões de casos de câncer são diagnosticados a cada ano. Alguns dos tipos mais freqüentes de câncer podem ser curados por cirurgia, quimioterapia ou radioterapia, se forem detectadas precocemente (WHO, 2007). A síntese de análogos estruturais de substâncias bioativas, visa aumentar a atividade biológica minimizando os efeitos colaterais. Derivados tiazolidínicos são heterocíclos ativos, com propriedades anticâncer, antibacteriana, antidepressiva, antiinflamatória, anticonvulsivantes, hipoglicemiante, antimicrobiana, analgésica, entre outras (BONDE et al., 2004). Produtos citotóxicos potentes atuam em fases específicas do ciclo celular, exercendo ação contra células em processo de divisão. Portanto as neoplasias malignas suscetíveis ao tratamento quimioterápico possuem um alto percentual de células em divisão (OLIVEIRA et al., 2004). Derivados da tiazolidinadiona foram relatados como indutores de apoptose em linhagens de células cancerosas e mais recentemente tem se mostrado ativo contra células cancerosas do pulmão resistentes à drogas. Assim, embora essa inibição ainda não seja satisfatória, torna-se necessário ampliar as pesquisas buscando melhorar a propriedade inibitória e antiproliferativa destas células. Isso pode ser feito colocando um ou mais grupos no anel arilideno de tiazolidinediona substituídas (GOUVEIA et al., 2009). Diante do exposto este trabalho objetivou promover a síntese e avaliação citotóxica do 5-(10-cloro-antraceno-9-il-metileno)-3-[2-oxo-2-(3-oxo-3,4-diidro-2H-benzol[1,4] oxazin-6-il)-etil]-tiazolidina-2,4-diona) (III) frente as linhagens de células HEp-2 e NCI-H292
MATERIAL E MÉTODOS: O derivado tiazolidínico sintetizado, 5-(10-cloro-antraceno-9-il-metileno)-3-[2-oxo-2-(3-oxo-3,4-diidro-2H-benzol[1,4]oxazin-6-il)-etil]-tiazolidina-2,4-diona) (III), foi obtido por condensação de Knoevenagel do composto 3-[2-oxo-2-(3-oxo-3,4-diidro-2H-benzo[1,4]oxazin-6-il)-etil]-tiazolidina-2,4-diona (I) com o 10-cloro-9-formil-antraceno (II). O composto (I) foi adicionado em quantidades equimolares em um balão de fundo redondo sob agitação magnética a frio, em 4 mL de etanol absoluto, e acrescentado 4 gotas de piperidina. Uma hora depois foi colocado o mesmo número de mols do composto (II) e solubilizado em 3 mL de acetato de etila. A reação ocorreu durante 17 horas sob agitação e refluxo a 80 ºC. Após o término desta reação o produto foi resfriado, filtrado e recristalizado em etanol. A atividade citotóxica foi avaliada pelo método do MTT, que se baseia na conversão do sal 3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5-difenil-2-H-brometo de tetrazolium (MTT) em azul de formazan, a partir de enzimas mitocondriais presentes somente nas células metabolicamente ativas. Os testes para a determinação da atividade citotóxica foram realizados com células de linhagem Hep-2 (carcinoma de epidermóide de laringe) e linhagem NCI H-292 (carcinoma muco epidermóide de pulmão). Foi utilizada uma suspensão de 5x104 células/mL; a suspensão foi distribuída em placa com 96 poços (225 µL em cada poço), aos quais foi acrescido 25 µL da substância teste, nas concentrações 50,0; 10,0; 5,0 e 1,0 µg/L. Após 72 horas de incubação a 37 °C em atmosfera úmida foram adicionados 5,0 µL de MTT em cada poço. As placas foram reincubadas nas mesmas condições, por um período de duas horas, após o qual o meio de cultura foi removido e foi adicionado 1,0 µL de DMSO em cada poço, para solubilização dos cristais (Formazan).
RESULTADOS E DISCUSSÃO: O composto 5-(10-cloro-antraceno-9-il-metileno)-3-[2-oxo-2-(3-oxo-3,4-diidro-2H-benzol[1,4]oxazin-6-il)-etil]-tiazolidina-2,4-diona) (III), teve suas constantes físicas determinadas com rendimento 92,4%, Rf 0,46 no sistema cromatográfico de camada delgada (CHCl3/MeOH) na proporção 0,88:0,12) e PF 304 ºC. A estrutura química foi comprovada por métodos espectrométricos de Ressonância Magnética Nuclear de Hidrogênio e de Carbono treze (RMN1H; RMN13C), Infravermelho e espectroscopia de Massas. A caracterização molecular por RMN1H revelou picos de absorção que comprovam a estrutura molecular do composto. Todas as absorções, deslocamentos químicos e constantes de acoplamento foram determinadas tanto para a Ressonância de Hidrogênio como para o Carbono treze. O Infravermelho em pastilhas de KBr apresentou todas as bandas referentes às absorções funcionais de todos os grupamentos químicos existentes no composto, mostrou deformação axial de NH de amida em ligação de hidrogênio, a 2983-27000 cm-1, deformação axial de aromático em 2900-2850, def. simétrica de C=O acoplado em 1730-1684; def. axial de C=C aromático, 1401-1500; def. axial de C-O, 1250-1200, def. angular de C-H aromático, 1000-750 cm-1. O método espectroscópico de Massas mostrou o peso molecular exato. O composto (III) apresentou moderada atividade inibitória para as duas linhagens de células (Hep-22 e NCI H-292). Para a linhagem de células Hep-2, não apresentou inibição nas concentrações 1,25 e 2,5 µg/mL. Porém, nas concentrações 5 e 10 µg/mL, apresentou percentuais de inibição de 24,5 e 45,3%, respectivamente. Para a linhagem NCI H292, apresentou atividade inibitória em todas as concentrações. Os percentuais obtidos foram os seguintes: 18; 23,5; 23,7; 33,1%; nas concentrações 1,25; 2,5; 5 e 10 µg/mL respectivamente.
CONCLUSÕES: O derivado tiazolidínico 5-(10-cloro-antraceno-9-il-metileno)-3-[2-oxo-2-(3-oxo-3,4-diidro-2H-benzol[1,4]oxazin-6-il)-etil]-tiazolidina-2,4-diona) (III), (Ju-312) apresentou as constantes físicas que contribuíram para determinar a pureza do composto. A atividade citotóxica foi determinada em duas linhagens de células que foram utilizadas na execução do teste. Porém, o composto inibiu a linhagem NCI H-292 em todas as concentrações, o que não ocorreu com as células da linhagem Hep-2. O composto foi obtido dentro das normas planejadas tendo a sua estrutura comprovada por métodos espectrométricos.
AGRADECIMENTOS: A equipe técnica da Central Analítica da UFPE, pelas analises espectroscópicas do composto descrito no tema.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: [1] GUYTON, ARTHUR C. 1992. Tratado de Fisiologia Medica. 8ª Edição, Guanabara-Koogan, Rio de Janeiro.
[2] World Health Organization (WHO) 2007. Health topics, Cancer. www.who.int/topics/cancer/. acessado em 06 de janeiro de 2.
[3] BONDE, C. G.; GAIKWAD, N. J. 2004. Synthesis and preliminary evaluation of some pyrazine containing thiazolines and thiazolidinones as antimicrobial agents, Bioorganic & Medicinal Chemistry 12, 2151–2161.
[4] OLIVEIRA, R. B.; ALVES, R. J. 2002.Agentes Antineuplásicos Biorredutíveis: Uma Nova Alternativa Para o Tratamento de Tumores Sólidos. Quim. Nova, v. 25, n.6, p.976-984.
[5] GOUVEIA, F.L.; OLIVEIRA, R. M.B. de; OLIVEIRA, T. B. ; SILVA, SILVA, I.M.; NASCIMENTO, S. C. do; SENA, K. X.F.R. de; ALBUQUERQUE, J.F.C. 2009 Synthesis, antimicrobial and cytotoxic activities of some 5-arylidene-4-thioxo-thiazolidine-2-ones, European Journal of Medicinal Chemistry 44 2038–2043
