ÁREA: Produtos Naturais
TÍTULO: ATIVIDADE ANTICOLINESTERÁSICA DOS CONSTITUINTES VOLÁTEIS DE Crotalaria retusa
AUTORES: OLIVEIRA JR., E. A. (UFPI) ; LUSTOSA, M. C. G. (UFPI) ; ALVES, M. J. (UFPI) ; FEITOSA, C. M. (UFPI) ; ARAÚJO, S. B. (UFPI) ; LIMA, S. G. (UFPI)
RESUMO: Crotalaria são leguminosas com mais de 40 espécies conhecidas no Brasil, está presente em sua composição o alcalóide pirrolizidínico monocrotalina. Os constituintes voláteis foram extraídos por hidrodestilação das folhas. O óleo essencial obtido foi analisado por CG-EM e submetido a teste com enzima acetilcolinesterase. A análise dos constituintes voláteis identificou três constituintes principais: fitol (20,98 %), beta - farneseno (18,56 %) e biciclogermacreno (11,9 %). No teste com a enzima acetilcolinesterase o óleo essencial de C. retusa demonstrou um potencial inibitório frente à enzima.
PALAVRAS CHAVES: crotalaria retusa, óleo essencial, atividade anticolinesterásica
INTRODUÇÃO: Crotalarias são plantas pertencentes à família Leguminosae de ocorrência em zonas tropicais e subtropicais, são plantas invasoras muito frequentes em plantações de grãos e pastagens. Há cerca de 40 espécies desse gênero conhecidas no Brasil, sendo muito consumidas por animais nos períodos de escassez de alimentos. Tais plantas podem causar grandes prejuízos econômicos, ocasionadas pela intoxicação do gado e exposição dos humanos que as utilizam na medicina popular (BARRETO et al, 2006). Plantas do gênero Crotalaria são compostas por uma grande quantidade de alcalóides pirrolizidínicos (APs), toxinas comuns a um grande número de plantas sendo prejudiciais a animais e humanos. O alcalóide pirrolizidínico majoritário para o gênero é a monocrotalina sendo primeiramente hepatotóxica possuindo ainda efeitos pneumotóxicos, nefrotóxicos, cardiotóxicos, fetotóxicos e carcinogênicos (BARRETO et al, 2006).
A acetilcolinesterase (AChE) é uma enzima que catalisa a hidrólise da enzima acetilcolina na transmissão do impulso nervoso na sinapse colinérgica e entre neurônios colinérgicos. A enzima está ligada à membrana basal entre as membranas pré e pós sinápticas desempenhando seu papel fisiológico (BERTÉ, 2009). O presente estudo identifica os constituintes voláteis das folhas de Crotalaria retusa bem como sua atividade anticolinesterásica.
MATERIAL E MÉTODOS: As amostras foram coletadas em Teresina - PI e a identificação dos espécimes foram realizadas no Herbário Graziela Barroso-UFPI, onde foram depositadas as exsicatas dos materiais coletados. Os constituintes voláteis foram extraídos a partir das folhas da planta, utilizando-se um sistema de hidrodestilação tipo Clevenger. Os constituintes voláteis obtidos foram analisados e identificados por CG-EM, foi utilizado um cromatógrafo gasoso marca SHIMADZU modelo GC-17A, acoplado a um espectrômetro de massas GCMS QP5050A e submetidos a teste com (AChE) através do método ELLMAN et al. (1961), adaptado para CCD por RHEE et al. (2001).
RESULTADOS E DISCUSSÃO: A Figura 1 mostra o cromatograma dos constituintes voláteis que mostrou 14 picos, com predominância de três compostos: fitol (20,98 %), beta- farneseno (18,56 %), biciclogermacreno (11,9%). Já a Tabela 1 apresenta as porcentagens das áreas integradas no cromatograma de íons totais para os constituintes voláteis de folhas de C. retusa. Pesquisas apontam drogas provenientes de produtos naturais como sendo eficazes no tratamento da doença de Alzheimer. Uma das abordagens consiste no tratamento colinérgico da doença, e o método que demonstrou maior eficácia clínica é o uso de inibidores diretos da enzima acetilcolinesterase. Os resultados positivos (5 e 10 mg/mL) para a inibição da enzima (AChE) foram evidenciadas pelo aparecimento de manchas brancas em campo de coloração amarela.
CONCLUSÕES: A análise do óleo essencial por CG/EM permitiu identificar seus principais constituintes. O teste com a enzima acetilcolinesterase mostrou que o óleo essencial de C. retusa apresentou potencial inibitório frente à enzima, confirmando sua importância e ampliando as perspectivas de estudo da espécie. A análise do óleo essencial detectou substâncias novas que não puderam ser identificadas pela análise do CG/EM sugerindo a continuidade deste trabalho, e posterior investigação de atividades biológicas.
AGRADECIMENTOS:
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: BARRETO, R. A.; HUGHES, J. B.; SOUZA, C. S.; SILVA, V. D. A.; SILVA, A. R.; VELOZO, E. S.; BATATINHA, M. J. M.; COSTA, M. F. D.; EL-BACHÁ, R. S.; COSTA, S. L. 2006. O alcalóide monocrotalina, extraído de Crotalaria retusa, altera a expressão de GFPAP, a morfologia e o crescimento de culturas primárias de astrócitos. Rev. Bras. Saúde, 7: 112-127.
BERTÉ, T. E. 20009. Estudo da atividade anticolinesterásica dos compostos taraxerol e ácido ursólico: Implicações sobre os processo de memória. UNIVALI – SC.
ELLMAN, G. L.; COURTNEY, K. D.; ANDRES, V.; FEATHERSTONE, R. M. 1961. A new and rapid colorimetric determination of acetylcholinesterase activity. Biochem Pharmacol, 7: 88-95.
RHEE, I. K.; VAN DE MEENT, M.; INGKANINAN, K.; VERPOORTE, R. 2001. Screening for acetylcholinesterase inhibitors from Amaryllidaceae using silica gel thin-layer chromatography in
combination with bioactivity staining. J Chromatogr A, 915: 217-223.
