ÁREA: Iniciação Científica

TÍTULO: Estudo da Atividade de Oviposição do Mosquito Aedes aegypti frente à Aldeídos Isolados e Identificados em Aloe vera (Liliaceae).

AUTORES: Bastos, A.M. (UFAL) ; Andrade, M.C.C. (UFAL) ; dos Santos, A.P. (UFAL) ; dos Santos, A.L. (UFAL) ; Sant'ana, A.E.G. (UFAL) ; Goulart, H.F. (UFAL) ; Birkett, M.A. (ROTHAMSTED RESEARCH)

RESUMO: Este trabalho consistiu no estudo da resposta oviposicional do mosquito Aedes aegypti,o principal vetor da dengue frente ao nonanal e undecanal nas concentrações de 0,1;0,01;0,001 ppm visando o desenvolvimento de novas metodologias que deverão ser utilizadas em ações de controle deste mosquito.Os aldeídos testados em bioensaios comportamentais de oviposição foram obtidos a partir de infusão de Aloe vera (liliaceae) e puderam ser extraídos pela técnica de extração SBSE (extração por sorção em barras de agitação)e isolados e identificados por cromatografia gasosa seguida de cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC/MS) juntamente com co-injeções com amostras idênticas sintéticas. Os resultados dos bioensaios foram analisados estatisticamente pelo teste t student.

PALAVRAS CHAVES: Aedes aegypti; Atraentes de oviposição; Dengue

INTRODUÇÃO: Em todo o planeta,mais de 40% da população mundial corre o risco de contrair o vírus da dengue.A dengue é uma infecção viral causada por arbovírus pertencente ao gênero Flavivirus,com ocorrência nas regiões tropicais e sub- tropicais do mundo,com predominância em áreas urbanas e semi-urbanas(OMS,2012). O vírus da dengue possui dois vetores de transmissão que são os mosquitos Aedes(Stegomyia) aegypti(Linnaeus, 1762) e o Aedes (Stegomyia)albopictus(Skuse).No Brasil,dentre essas duas espécies de transmissores,o Aedes aegypti é o único vetor que possui importância epidemiológica(BARRETO & TEIXEIRA, 2008; SILVA;MARIANO;SCOPEL,2008). Por não haver até o momento tratamento específico,nem vacina para a imunização contra a dengue uma das principais formas de prevenção e controle da doença,têm sido o combate aos mosquitos vetores por meio do uso intensivo de inseticidas(OMS,2012;BRAGA & VALLE,2007). Hoje, uma nova mentalidade ecologicamente correta existe, tendo como alternativa o uso de semioquímicos como atraentes em potencial para um grande número de espécies de insetos. É de conhecimento que as substâncias orgânicas naturais presentes em infusões de plantas podem atuar como atraentes de oviposição para mosquito do gênero Aedes e isto tem constituido uma alternativa eficiente e sustentável para a vigilância e controle de mosquitos vetores de doenças, uma vez que essas substâncias influenciam a atividade oviposicional em mosquitos (NAVARRO-SILVA,et. al.,2009.) Este trabalho consistiu em um estudo do comportamento de oviposição das fêmeas do Aedes aegypti frente a aldeídos isolados e identificados na infusão aquosa de Aloe vera(Liliaceae),a qual por sua vez,foi considerada como estimulante de oviposição do Ae.aegypti em estudos realizados anteriormente pelo grupo.

MATERIAL E MÉTODOS: As colônias do mosquito Ae. aegypti foram mantidas no Laboratório de Síntese e Isolamento de Feromônios (LaSIF) em um fotoperíodo de 12L:12E horas. A temperatura do laboratório foi mantida entre 30±2ºC, sendo a variação da umidade relativa do ar foi mantida entre 55 à 66%. Foram realizados bioensaios de oviposição com o Nonanal nas concentrações de 0,1 ppm à 0,0001 ppm e com o Undecanal nas concentrações de 0,1 ppm à 0,001 ppm. Em cada bioensaio foram utilizadas 10 gaiolas contendo 25 pupas fêmeas e 10 pupas machos. Após a emergência dos mosquitos foram contabilizados 4 dias para a realização do repasto sanguíneo. Foram então contabilizados mais 4 dias e o bioensaio comportamental de oviposição pode ser realizado. Assim, foram realizados testes de dupla-escolha entre a solução teste e a solução controle, as quais foram dispostas randomicamente em diagonal em cada uma das gaiolas utilizadas. Foi utilizado em cada um solução suporte de oviposição flutuante constituído por isopor e papel filtro. Os ovos obtidos através das duas soluções foram contabilizados com o auxílio de um contador digital e de um microscópio. Os dados obtidos através da contagem foram convertidos em porcentagens e submetidos a análise estatística pelo Teste T de Student, com o auxílio do programa Graph Pad 5. A extração da infusão de A. vera foi realizada pela técnica de extração por sorção com magneto de agitação (SBSE) a qual utilizou magnetos da marca Gerstel GmbH de comprimento 2,5 cm e tendo como fase sólida polidimetilsiloxano (PDMS). A Cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa foi realizada em aparelho Hewlett-Packard 5890 contendo coluna capilar apolar de polidimetilsiloxano(HP1).O gás de arraste utilizado foi o hélio. Impacto eletrônico à 70 eV, 250ºC.

RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os gráficos abaixo mostra de forma resumida a resposta da atividade de oviposição das fêmeas do Aedes aegypti obtida com os bioensaios realizados com o Nonanal em concentrações de 0,1 ppm à 0,1 ppb e com o Undecanal em concentrações de 0,1 à 0,001 ppm. A medida em que o Nonanal foi diluído, foi observada uma melhora na resposta da atividade oviposicional do Aedes aegypti com a substância, chegando próximo de atratividade satisfatória na concentração de 0,1 ppb. No bioensaio com o Undecanal a uma concentração de 0,1 ppm, observou-se que não houve seletividade entre as soluções (teste e controle), uma vez que os valores da média do número de ovos depositados na solução teste e na solução controle são bastante próximos. Ao realizarmos o bioensaio com a substância em uma concentração de 0,01 ppm, foi constatada uma preferência maior pela solução controle e, desse modo, a solução de Undecanal não pôde ser considerada atrativa. No bioensaio realizado com a substância em uma concentração de 0,001 ppm, foi observada a preferência pela solução testada, todavia a solução de Undecanal não pôde ser considerada atraente, uma vez que não existe diferença significativa entre a média de ovos depositados nas soluções.

Bioensaios com o Nonanal

Gráfico da análise estatística dos bioensaios comportamentais frente ao Nonanal, sob diferentes concentrações.

Bioensaios com o Undecanal

Gráfico da Análise Estatística dos bioensaios comportamentais com o Undecanal em diferentes concentrações.

CONCLUSÕES: Apesar do fato de não haver uma atratividade satisfatória nas concentrações testadas, foi constatado uma melhora na resposta oviposicional das fêmeas do Ae. aegypti, a medida em que as soluções teste foram diluídas. Assim, serão realizados novos testes com soluções com cencentrações menores do que as que foram utilizadas nesse trabalho. Também deverão ser feitos bioensaios com a combinação do Nonanal e do Undecanal, tendo como objetivo o estudo do efeito sinérgico das substâncias isoladas na atividade de oviposição do Ae. aegypti.

AGRADECIMENTOS: À UFAL, CNPq e Rothamsted Research.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: BARRETO, MAURÍCIO L.; TEIXEIRA, MARIA GLÓRIA. Dengue no Brasil: situação epidemiológica e contribuições para uma agenda de pesquisa. Estudos Avançados, São Paulo, v. 22, n. 64, p.53-72, 2008.

BRAGA, I. A.; VALLE, D. A. aegypti: inseticidas, mecanismos de ação e resistência. Epidemiol. Serv. Saúde, Brasília, v. 16, n. 4, p.279-293, 2007.

NAVARRO-SILVA, M. A.; MARQUES, F. A.; DUQUE L, J.E. Review of semiochemicals that mediate the oviposition of mosquitoes: a possible sustainable tool for the control and monitoring of Culicidae. Revista Brasileira de Entomologia. v.53, n.1, p.1-6, 2009.

SILVA, JESIEL SOUZA; MARIANO, ZILDA DE FÁTIMA; SCOPEL, IRACÍ. A dengue no brasil e as políticas de combate ao a. Aegypti: da tentativa de erradicação ás políticas de controle. Hygeia, Uberlândia, v. 3, n. 6, p.163-175, 2008.

ORGANIZAÇÃO MUNDIAL DE SAÚDE. Dengue and severe dengue. Disponível em: < http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs117/en/ >. Acessado em: 28 de maio de 2012.

ORGANIZAÇÃO MUNDIAL DE SAÚDE. Dengue. Disponível em: <http://www.who.int/tdr/research/ntd/dengue/en/>. Acessado em: 28 de maio de 2012.