ÁREA: Produtos Naturais
TÍTULO: POLISSACARIDEO EXTRAIDO DA ALGA MARINHA VERMELHA Hypnea musciformis REVERTE O EDEMA DE PATA INDUZIDO POR CARRAGENIAN E DEXTRAN E A MIGRAÇÃO DE NEUTROFILOS.
AUTORES: Brito, T.V. (UNIVERSIDADE FEDERAL DO PAIUÍ) ; Prudêncio, R.S. (UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ) ; Bezerra, A.S. (UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ) ; Vieira Júnior, F.C. (UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ) ; Brito, M.V. (INSTITUTO FEDERAL DO PIAUÍ) ; Cunha, F.P. (INSTITUTO FEDERAL DO PIAUÍ) ; Candeira, S.N. (UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ) ; Medeiros, J.R. (UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ) ; Barbosa, A.L.R. (UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ)
RESUMO: Substâncias provenientes de plantas são valiosas para a medicina farmacêutica por
apresentarem interação com sistemas biológicos demonstrando atividade
farmacológica. As algas marinhas têm sido bastante estudadas por apresentarem na
sua constituição polissacarídeos, que são frações que melhor se enquadram no campo
de produtos com capacidades terapêuticas por apresentarem peculiaridades na sua
estrutura. O presente estudo teve como objetivo avaliar a capacidade terapêutica
do polissacarídeo (PLS) extraído da alga vermelha Hypnea musciformis em modelos de
inflamação. De fato o PLS em questão teve ação antiedematogênica e antimigratória,
assim é sugestivo que esse PLS possui atividade anti-inflamatória por inibir o
edema de pata e por antagonizar a migração de células para o peritôneo.
PALAVRAS CHAVES: Inflamação; Polissacarídeo; Migração neutrofílica
INTRODUÇÃO: A identificação de compostos bioativos de plantas tornou-se uma área muito ativa
de pesquisa farmacêutica. Tais compostos têm sido aplicados no tratamento de
diferentes condições, incluindo ansiedade, dor, inflamação (SOUSA O.V.et al.,
2010). Um campo bastante promissor é o das algas marinhas, por apresentar
compostos com características peculiares para o tratamento terapêutico de
diversas doenças. Esses organismos marinhos têm sido relatados por exibem um
amplo espectro de atividade farmacológica, incluindo, efeitos anti-inflamatórios
(MAYER, A. M. et al., 2009). Os polissacarídeos (PLS) são uma das frações dessas
algas que melhor se enquadram nesse contexto, porque apresentarem
características peculiares na sua estrutura e boa interação biológica. Sabendo
do potencial terapêutico dos polissacarídeos (PLS) extraidos de algas marinhas,
o presente trabalho teve como objetivo avaliar o potencial anti-inflamatório de
um polissacarídeo (PLS) extraído da alga Hypnea musciformis,, mediante análise
do edema de pata induzido por carragenina ou dextran bem como avaliar a migração
de neutrófilos para a cavidade peritôneal induzido por carragenina em
camundongos tratados com o polissacarídeo sulfatado (PLS) da alga.
MATERIAL E MÉTODOS: Foram utilizados camundongos Swiss machos. Para o edema de pata foram usados
carragenina (Cg) 500μg/pata, 50μl ou dextran 500μg/pata, 50μl que foram
administrados intraplantarmente (i.p.). Uma hora antes da aplicação destes
agentes flogísticos supra-citados, os animais foram tratados com as seguintes
doses de PLS, indometacina: 2,5mg/kg do PLS, 5mg/kg do PLS, 10mg/kg do PLS e
Indometacina 10mg/Kg/(i.p.). O grupo controle recebeu somente solução salina na
pata. O volume da pata traseira direita de cada camundongo foi medido usando
pletismômetro (UGO BASILI) antes da injeção do estímulo inflamatório (tempo
zero) e 1, 2, 3 e 4 horas após a injeção da carragenina (Cg) ou 30 minutos, 1,
2, 3 e 4 horas após a injeção do dextran. O edema foi calculado como a variação
de volume.
Para a determinação da migração neutrofílica para cavidade peritoneal foi
administrado 250 µl i.p.(intraperitoneal) de salina estéril 0.9%, indometacina
10mg/kg e PLS 10 mg/kg (a dose de escolha) 30 min. antes da administração do
estímulo flogístico, que ocorreu por injeção intraperitoneal de 250 µl de
carragenina (Cg) 500 µg/cavidade. Quatro horas depois da administração da
carragenina os camundongos foram anestesiados com tribromoetanol 250 mg/kg e
eutanasiados e em seguida foi feito a incisão abdominal com bisturi e o exsudato
da cavidade peritoneal foi colhido lavando a cavidade com 1.5 ml de solução
tampão de fosfato heparinizado (PBS) com o auxílio de uma pipeta Pasteur. Os
volumes recuperados foram semelhantes em todos os grupos experimentais e
compararam-se a aproximadamente 95% do volume injetado. Foram executadas as
contagens totais em uma câmara de Newbauer e a contagem diferencial de célula
(soma de 100 células) após centrifugação e coloração com hematoxilina-eosina.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: No edema por carragenina (Cg), o grupo tratado com PLS (10mg/kg) reduziu
significativamente o edema em 93,62% e 88,46% na terceira e quarta hora
respectivamente depois da aplicação da droga. O tratamento (i.p.) dos animais
com PLS, 30 min antes da injeção local de dextran, reduziu significativamente o
edema em 97,40% e 100% em 30 min. e 1 hora respectivamente, quando comparado ao
grupo tratado apenas com dextran. Dessa forma fica claro que o PLS reduz o edema
por agir inibindo os mediadores da inflamação, visto que a carragenina (Cg)
promove o edema por liberação de citocinas, prostaglandinas, Óxido Nítrico. O
dextran é uma droga que promove a inflamação através da vasodilatação. Nesse
experimento o PLS também demonstrou capacidade redutora do edema, assim põe-se
em destaque sua capacidade de inibir a vasodilatação provocada pelo estímulo
inflamatório.
Os animais que receberam a administração do polissacarídeo (10mg/kg, i.p.) na
peritonite apresentaram uma redução significativa do número de leucócitos totais
que migraram para a cavidade peritoneal quando se comparou o grupo Cg (7970 ±
1068 10³ células/ml) ao grupo PLS + Cg (550.0± 97.47 10³celulas/ml). O PLS
também reduziu significativamente o número de leucócitos (migração de
neutrófilos) na contagem diferencial quando se comparou o grupo Cg (4678.9 ±
317.3 10³ células/ml) ao grupo PLS + Cg (208.6 ± 46.84 103 células/ml). Como se
pode observar a dose referida do PLS mostrou-se eficiente antagonizando a
migração de células pró-inflamatórias para a cavidade peritoneal (nível de
significância de p<0,05), diminuindo significativamente o número de células que
migraram.
Tabela1. Efeito do polissacarídeo (PLS) no edema de pata em camundongo
A porcentagem(%) de inibição do edema esta
indicada entre parênteses. O * indica valores (P <
0.05), com analise estatística (ANOVA) seguido do
teste de Bonferroni.
Figura 1.Efeito de polissacárido sulfatado sobre o edema da pata induz
Edema de pata induzido por, carragenina (Cg) (fig.
1-A; 500μg/pata/50μL), dextran (fig. 1-B;
500μg/pata/50μL) injeções na região plantar da
pata direita.
Figura 2. Efeito anti-inflamatório de fracção de polissacárido sulfata
Fig.2-a, A contagem total de leucócitos e fig.2-b ,
A contagem de neutrófilos por cavidade. A peritonite
foi induzida por carraginina 500 µg/kg.
CONCLUSÕES: Como nosso estudo demonstrou através dos experimentos acima citados, o
polissacarídeo extraído da alga vermelha Hypnea musciformis teve uma ação
antiedematogênica por reduzir os edemas de carragenina e dextran além de exercer
efeito antiinflamatório na peritonite induzida por carragenina, sugerindo uma ação
que de alguma forma diminui a migração celular, sendo causado pelo princípio ativo
presente nesse polissacarídeo. Portanto pode-se sugerir dessa forma que o nosso
PLS possui uma atividade anti-inflamatória e participa antagonizando os eventos
químicos e celulares do processo inflamatório.
AGRADECIMENTOS: Agradecemos à Universidade Federal do Piauí (UFPI) e ao CNPq
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: MAYER et al. Marine pharmacology in 2005-06: Marine compounds with antihelmintic, antibacterial, anticoagulant, antifungal, anti-inflammatory, antimalarial, antiprotozoal, antituberculosis and antiviral axctivities; affecting the cardiovascular, immune and nervous systems, and other miscellaneous mechanisms of action. Biochim.Biophys. Acta, v.1790, n.5, p.283-308, 2009.
SOUSA et al. Antinociceptive and anti-inflammatory activities of the ethanol extract of Annonamuricata L. leaves in animal models. Int. J. Mol. Sci.11:2067–2078, 2010.
