ÁREA: Produtos Naturais
TÍTULO: AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE E FOTOTOXIDADE DAS FRAÇOES ACETATO DE ETILA E ETANOLICA DO EXTRATO BRUTO DE Bidens sulphurea
AUTORES: Rodrigues do Sacramento Resende, J. (UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÂNDIA) ; Alberto de Oliveira, C. (UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÂNDIA) ; Pereira Garcês, B. (UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÂNDIA)
RESUMO: A terapia fotodinâmica é uma reação química ativada por luz usada para destruição
seletiva de um tecido e requer um agente fotossensibilizante no tecido-alvo, uma
fonte de luz e oxigênio. As fontes de luz utilizadas para a terapia fotodinâmica
devem emitir comprimentos de onda no espectro de absorção do fotossensibilizante
escolhido e assim produzir o oxigênio singlete. Neste trabalho foi analisado a
atividade citotóxica e fototóxica das frações acetato de etila e etanólica de
Bidens sulphurea da família Asteraceae. A mortalidade celular foi quantificada
utilizando-se o teste de viabilidade celular com o corante resazurina. Os
resultados mostram que na fração acetato de etila há uma maior quantidade do
agente fotossensibilizante.
PALAVRAS CHAVES: inativação fotodinâmica; citotoxidade; fototoxicidade
INTRODUÇÃO: A terapia fotodinâmica (TFD) é definida como uma reação fotoquímica utilizada
com o objetivo de causar destruição seletiva de um tecido. É uma técnica
terapêutica de duas etapas, na qual a utilização de uma droga sensibilizante,
tópica ou sistêmica, é seguida da irradiação de uma luz visível. Os
fotossensibilizantes, administrados exogenamente ou formados endogenamente, são
ativados pela luz e transferem energia ao oxigênio molecular, gerando espécies
reativas de oxigênio (oxigênio singlete) para induzir a morte celular. A
inativação fotodinâmica (“PDI, Photodynamic Inactivation”), sendo efetiva contra
vírus, bactérias e fungos, pode ser usada como uma terapia para infecções
localizadas. Assim este trabalho tem como objetivo avaliar a atividade
fotodinâmica das frações acetato de etila e etanólica do extrato de Bidens
sulphurea da família Asteraceae na fotoinativação de células de Saccharomyces
cerevisiae, verificando assim a predominância da fototoxicidade ou
citotoxicidade, uma vez que este organismo tem características similares as
células cancerígenas.
MATERIAL E MÉTODOS: Para verificar se as frações do extrato de Bidens sulphurea impossibilitam o
crescimento do fungo Saccharomyces cerevisiae, foi utilizado o método de
diluição em microplacas, devido à eficiência e maior praticidade. Foram
adicionados nas microplacas 100 µL de água em condições de esterilidade, em
seguida foram feitas sucessivas diluições com a os extratos. Após estas
diluições, foram colocados 100 µL da levedura, em cada poço contendo a droga, de
forma que pudesse ocorrer a interação entre eles durante 30 minutos. As células
foram irradiadas no aparelho WE-IV construído no próprio laboratório que
consiste em um arranjo de 4 lâmpadas fluorescentes de 20 W cada durante 1h.
Controle no escuro também foi realizado no mesmo intervalo de tempo. Em
seguida, foi adicionado o caldo BHI (brain heart infusion), de modo que possa,
ou não, ocorrer o crescimento dos fungos em um meio apropriado. As células foram
colocadas em estufa a 37ºC por 48h para crescimento. Para a quantificação da
morte celular foi utilizado o corante resazurina que é um corante vital que
perde a coloração como resultado de redução devido ao crescimento bacteriano,
corando as células vivas de róseo e as mortas de azul ou incolor. Foram
colocados em cada poço 10 µL do corante e as células foram colocadas em estufa
por mais 2h para posterior leitura visual.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados (Gráfico 1) mostram que a fração acetato de etila do extrato de
Bidens sulphurea apresentou uma maior atividade fototóxica do que citotóxica
frente à Saccharomyces cerevisiae. A fração etanólica do extrato também apresenta
atividade citotóxica considerável, porém sua atividade fotodinâmica foi inferior à
fração acetato de etila. Pode-se observar também que para menores concentrações do
inóculo a sensibilidade à inativação fotodinâmica. Estudos com outras espécies de
Bidens mostram que seus extratos são ricos em poliacetilenos, que são compostos
que possuem certa atividade fotodinâmica, e estes compostos normalmente estão nas
frações acetato de etila ou diclorometano.
Figura 1. Gráfico da Amostra
O gráfico 1 apresenta a Diluição Inibitória Mínima
utilizando as frações de extratos de acetato de
etila e fração etanólica com e sem irradiação.
CONCLUSÕES: A fração acetato de etila possui uma atividade fotodinâmica bastante elevada,
portanto o mesmo será mais estudado a fim de isolar e elucidar a estrutura dos
compostos que possuem esta atividade. Estes resultados são promissores, pois há
sempre a busca por fotosensibilizadores de baixo custo para esta técnica.
AGRADECIMENTOS: Agradecemos à CNPq, FAPEMIG, CAPES e IQUFU.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: DIAZ-RUIZ, R. et al.; Biochimica et Biophysica Acta, 19807 (2001) 568-576.
ISSA, M. C. A,; MANELA-AZULAY, M.; An. Bras. Dermatol. 85(4) (2010) 501-11.
