ÁREA: Iniciação Científica

TÍTULO: EXTRAÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DOS COMPONENTES DO FEROMÔNIO SEXUAL DE Cerconota anonella (Sepp.) (Lepidoptera:Oecophoridae)

AUTORES: Silva, R.C.C. (UFAL) ; Campos, R.S. (UFAL) ; Pires, E.V. (UFAL) ; Mendonça, A.L. (UFAL) ; Nascimento, R.R.N. (UFAL)

RESUMO: O presente estudo objetivou a identificação dos componentes do feromônio sexual de Cerconota anonella, bem como avaliar a sua eficiência em ensaios conduzidos em condições de laboratório. Inicialmente, houve a obtenção dos extratos hexânicos de fêmeas os quais foram submetidos à análise por Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (CG-EM). Os resultados revelaram quatro compostos majoritários, denominados: (OOI), (OA) (OM) e (OAL). A atividade biológica dos compostos individuais e de misturas ternárias e quaternárias destes compostos foi determinada em bioensaios de laboratório empregando machos virgens de C. anonella. A identificação dos compostos trabalhados está sendo resguardada, por estar sob sigilo de pedido de patente junto ao INPI.

PALAVRAS CHAVES: Feromônio sexual; anonáceas; Cerconota anonella

INTRODUÇÃO: Vários problemas fitossanitários, especialmente as pragas, vêm desestimulando o estabelecimento dos plantios comerciais de anonáceas. A família das anonáceas compreende um grande número de gêneros e espécies, sendo a maioria nativa de regiões tropicais e subtropicais. Entre as espécies cultivadas no Brasil de importância comercial, encontram-se a pinha (Annona squamosa) e a graviola (Annona muricata) (BRAGA SOBRINHO, 2010). Várias espécies de pragas atacam as Anonáceas, destacando-se a broca-do-fruto, Cerconota anonella considerada uma das mais sérias, pelos danos expressivos que causa à cultura (MELO, 2006). Diante deste fato, faz-se necessária a pesquisa envolvendo, a busca por metodologias de controle que envolvam os semioquímicos, cujo emprego seja efetivo no controle de C. anonella. De maneira análoga a outras espécies de lepidópteros, a comunicação entre machos e fêmeas de C.anonella é mediada por feromônios e a percepção destes sinais pelos machos desencadeia uma série de comportamentos que é expressa em uma sequência padrão (LIMA, 2001). Visto que na maioria dos lepidópteros, eles são constituídos de uma mistura de componentes e estas misturas estão fundamentadas não só na combinação de diferentes componentes, mas também na variação da razão entre eles, definindo a especificidade da comunicação olfativa (ANDO, T., INOMATA, S., YAMAMOTO, M., 2004). Assim, o presente trabalho objetivou identificar, através das técnicas de CG-EM os componentes do feromônio sexual de C. anonella e avaliar a eficiência do feromônio sexual em ensaios de laboratório.

MATERIAL E MÉTODOS: Inicialmente, houve a coleta de frutos brocados, para a obtenção dos insetos. Posteriormente, os experimentos foram conduzidos empregando-se hexano para lavagem da glândula abdominal de fêmeas de C. anonella em chamamento e com idade variando entre 2-3 dias. Estes extratos foram usados em bioensaios conduzidos em laboratório empregando machos coespecíficos. Os compostos presentes no extrato da glândula abdominal foram identificados pelo estudo comparativo dos espectros de massas da biblioteca NISTO8 e pelo cálculo do índice de Kovats com base de dados disponível em www.pherobase.com. Para calcular o índice de Kovats foi realizada co-injeção com uma série homóloga de n-alcanos (Sigma-Aldrich C7-C30) e para quantificar, foi adicionada às amostras 1 μL de 3-penten-2-ona como padrão interno. As identidades dos compostos a seguir estão sendo resguardados devido a um sigilo de patente. Os compostos padrões, a saber: OOI, OOII, OAL e OA foram obtidos comercialmente (Sigma-Aldrich®) e os compostos: OALI, OAL, OM e OMI foram sintetizados. Os compostos individuais e misturas foram testados em duas concentrações: 0,1 e 1,0 mg/mL, respectivamente. Nos ensaios de laboratório, procurou-se observar se a concentração e o grau de insaturação dos compostos e misturas testadas afetavam o comportamento de atração dos machos. Os tratamentos testados foram os seguintes: Compostos individuais denominados OM, OAL, OOl e OA; mistura quaternária de compostos saturados [(1 (OM): 3 (OAL): 5 (OOI): 5 (OA)]; mistura ternária de compostos insaturados [1 (OMI) 3 (OALI): 5 (OOII)], mistura ternária de compostos saturados [1(OM):3 (OAL):5(OOI)], disco de papel de filtro limpo e disco de papel de filtro impregnado com hexano.

RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados apresentaram uma gama de compostos, dos quais os mais promissores também compõem a mistura feromonal liberada por alguns lepidópteros (FRANCKE et al., 2004; NAKA et al., 2006; HEDIN et al., 1986; SUBCHEV M. et al., 2000). A identidade destes compostos está designada, por siglas, objetivando a proteção da identidade dos mesmos, visto que, esses compostos estão sob sigilo de patente (Tabela 1). Deste modo, as análises químicas dos extratos de abdômen de C. anonella foram norteadas no sentido de se detectar a presença dos seguintes compostos: (OOI), (OM), (OA) e (OAL) nas amostras analisadas. A presença de OOI, OA, OAL e OM nos extratos hexânicos de abdômens de fêmeas de C. anonella, foi confirmada através de comparação dos tempos de retenção com compostos padrões bem como co-eluição com os mesmos. Os componentes químicos, quando testados individualmente, apresentaram respostas semelhantes nos machos de C. anonella (Tabela 2).

Tabela 1- Caracterização química do extrato

Caracterização química do extrato da glândula abdominal de C. anonella.

Tabela 2 – Ensaios de laboratório empregando C. anonella.

As médias com letras diferentes diferem entre si pelo teste de Tukeya nível de 5% de probabilidade (p<0.05).

CONCLUSÕES: Em relação às misturas testadas em laboratório, ficou evidenciado que as misturas dos compostos sintéticos podem ser consideradas, tão atraentes para machos quanto os extratos de fêmeas virgens. Pelo exposto, é seguro afirmar que, os compostos reportados neste estudo são constituintes do feromônio sexual de C. anonella.

AGRADECIMENTOS: CNPq, CAPES, UFAL e IQB.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: ANDO, T., INOMATA, S., YAMAMOTO, M., 2004. Lepidopteran Sex Pheromones. Topics in Current Chemistry 239, 51-96.

BRAGA SOBRINHO, R. Potencial de exploração das anonáceas no nordeste do Brasil. Embrapa Agroindústria Tropical, Fortaleza, 2010.

LIMA, E.R. Feromônio sexual do bicho-mineiro do café, leucoptera coffeella: avaliação para uso em programas de manejo integrado.Tese de “DoctorScientiae”. Viçosa Minas Gerais. 2001.

FRANCKE., W., et al. New type of Sesiidae sex pheromone identified from hornet moth Sesiaapiformis. J. Chem. Ecol. v.30 p.805–817, 2004.

HEDIN PA., et al. Identification of the sex attractant pheromone of the southwestern corn borer Diatraea grandiosella (Dyar). J. Chem. Ecol. v.12, p.2051–2063, 1986.

MELO, B. S. C. Avaliação do potencial inseticida de produtos naturais e sintéticos o brocas da graviola. Dissertação (Mestrado em Agronomia) – Departamento de Fitotecnia, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2006.

NAKA., H., et al. Synthesis and characterization of 3,13- and 2,13-octadecadienyl compounds for identification of the sex pheromone secreted by a clearwing moth, Nokona pernix. Biosci.Biotechnol.Biochem. v.70 p.508– 516, 2006.

SUBCHEV M., et al. 1-Methylethyl octanoate, a new lepidopteran sex pheromone from the bagworm, Megalophanes viciella. Journal of Chemical Ecology. v. 26, n. 2, 2000.