Autores
Surco-laos, F. (UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA) ; Valle-campos, M. (UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA) ; Loyola-gonzales, E. (UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA) ; Castillo-romero, P. (UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA) ; Yarasca-arcos, L. (UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA) ; Quispe-sanchez, C. (UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA) ; Tataje Napuri, F. (UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA) ; Pisconte-vilca, J. (UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA) ; Panay-centeno, J. (UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA) ; Pari-olarte, J. (UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA)
Resumo
La especie Conyza bonariensis “venadillo es una planta propia del continente
americana que en la medicina popular peruana se emplea en varias afecciones, el
presente estudio tuvo como objetivo evaluar la propiedad antioxidante,
polifenoles totales, flavonoides y minerales del extracto etanólico de las
partes aéreas de esta especie. Se empleo los métodos de DPPH, FRAP y ABTS para
la determinación de la actividad antioxidante, los polifenoles totales por Folin
Ciocalteu. Flavonoides por tricloruro de aluminio y los minerales por absorción
atómica. Como resultados se obtuvo que la actividad antioxidante expresado como
µM de trolox por g de extracto fue de 791, 662 para los métodos de FRAP ABTS
respectivamente y por DPPH un IC50 de 0,86 mg/mL equivalente a 0,45mM; los
polifenoles totales 167
Palavras chaves
Extracto; Antioxidante; Minerales
Introdução
La medicina tradicional basada en los conocimientos ancestrales de la población
para prevenir, diagnosticar y/o tratar diversas enfermedades hace uso de
diferentes recursos y entre estos, las plantas han sido usadas durante miles de
años. Se considera que un gran porcentaje de la población mundial tiene como
único acceso a tratamientos de enfermedades o recuperación de la salud a las
plantas (SHI et al., 2010). La especie Conyza bonariensis “venadillo es una
planta cosmopolita, originaria de América del Sur que fue descrita por primera
vez en Argentina (HANWEN, 2007), en el continente americano se le considera como
una planta maleza, a pesar de que en ciertos lugares del Perú se le atribuye
algunas propiedades según la medicina popular; es así, como en los mercados de
la ciudad de Trujillo se le comercializa recomendándola para ciertos tipos de
cáncer y procesos inflamatorios (MOSTASERO et al, 2019). Estudios en otros
países le atribuye propiedades antioxidantes y antibacteriana al extracto de las
hojas (YIDNEKACHEW Y TAMENE 2021; ANDRADE 2015) y actividad antiinflamatoria y
antimicótica (MANZANO et al 2011); el aceite esencial de las partes aéreas de
tres especies del género Conyza y entre ellas, la especie bonariensis
demostraron tener un efecto larvicida contra los mosquitos Aedes aegypti, Ae.
albopictus y Culex quinquefasciatus (MINH HOI et al., 2020), en otro estudio el
aceite esencial de las partes aéreas mostro un importante efecto bactericida
frente a Bacillus cereus, mientras que se observó una actividad moderada frente
a Staphylococcus epidermidis y Candida albicans (ARAUJO et al., 2013).
Considerando que las plantas son capaces de absorber metales del suelo, la
seguridad, la calidad y la eficacia de los productos naturales se han vuelto
cuestionables (SHING et al 2011); el consumo de extractos vegetales con fines
terapéuticos puede ser una fuente de elementos minerales esenciales o una vía de
exposición humana a sustancias tóxicas como los metales pesados (ARTWELL et al.
2017). El objetivo de esta investigación fue evaluar la propiedad antioxidante,
polifenoles totales, flavonoides y minerales del extracto etanólico de las
partes aéreas de esta especie teniendo en cuenta que posee una considerable
acogida en la medicina popular, a pesar de no poseer estudios científicos que
respalden los usos de la medicina tradicional y con el conocimiento que los
metabolitos secundarios en las especies vegetales pueden variar de un lugar a
otro debido a diversos factores agronómicos y tomando en consideración que la
especie objeto de este estudio fue recolectada de una zona de estrés hídrico y
térmico se motivó el presente trabajo
Material e métodos
Material vegetal. fue recolectado en el distrito de Yauca del Rosario de la
ciudad de Ica, zona árida desértica a 825 msnm en las coordinadas geográfica
14°10′25″S 75°22′41″O / -14.1737219, -75.3779765, en las primeras horas de la
mañana y trasladada en bolsa de papel a las instalaciones del laboratorio, una
porción de esta especie se identificada en el museo de historia natural con el
registro, una porción fue secada, molida y tamizada en malla 20, en el
laboratorio de química general de la facultad de Farmacia y Bioquímica de la
Universidad Nacional San Luis Gonzaga.
Extracto fue obtenido por maceración 500g de la especie seca y molida en alcohol
de 96° por un tiempo de 15 días con agitación interdiario, luego se filtró a
través de papel de filtro lento y el filtrado se concentro en un evaporador
rotatorio (Buchi R-250) y posteriormente secado en estufa (Binder ED 53) a 40°C
hasta obtener un extracto seco de color verde oscuro, al cual se le realizo
pruebas de caracterización como solidos totales/humedad ( secado a estufa a 105
°C por espacio de dos horas), cenizas (calcinado en horno mufla Thermo
Scientific a 560 °C), pH ( potenciométrico Hanna HI 2210) y solidos solubles
(refractómetro a una solución al 10% a 20 °C Atago DR A1), según AOAC (2019); se
efectuó una marcha fitoquímica con solventes diferentes polaridades para la
determinación de los diferentes metabolitos secundarios con reacciones de
coloración y/o precipitación (LOCK 1994). La actividad antioxidante se determinó
por los métodos: 1,1-difenil-2-picril-hidrazilo (DPPH) se llevó a cabo por
medio de una solución del radical sintético DPPH 0.5 mM en etanol, tomando 100
µL de las diferentes concentraciones del extracto a evaluar en un vial, se
adicionaron 500 µL de etanol y 200 µL de DPPH, se homogenizó e incubó en la
oscuridad por 30 min. Transcurrido el tiempo se midió la absorbancia a 517 nm
usando como blanco etanol (Peak Instrumental C-7100) hallando el porcentaje de
inhibición para cada concentración y el respectivo IC50; el ensayo de
decoloración ácido 2,2'-azino-bis-3-etilbenzotia-zolin-6-sulfónico (ABTS) 100 µL
de las diferentes concentraciones del extracto o estándar de Trolox se mezcló
con 1 mL de solución de ABTS a 30 °C incubando 30 min en oscuridad. Se midió la
absorbancia a 734 nm (Peak Instrumental C-7100UV-Vis). Se realizó una curva de
calibración de Trolox (entre 0 y 500 µM) como referencia usando etanol como
solvente., el ensayo de la Capacidad de reducción Férrica Antioxidante (FRAP) se
preparó el reactivo FRAP con 2,5 ml de solución TPTZ (2,4,6-Tri(2-pyridyl)-s-
triazin) 10 mM, 2,5 ml de solución FeCl3 20 mM y 25 ml de buffer acético/acetato
300mM, se tomaron 1500 µL de reactivo se mezcló con 50 µL de las diferentes
concentraciones del extracto, o solución de Trolox e incubados a 37 °C/30 min.
La absorbancia fue medida pasados los 30 minutos de incubación a oscuridad a 595
nm, usando buffer de acético/acetato como blanco (Peak Instrumental C-7100 UV-V
Resultado e discussão
Tabla 1. Caracterización del extracto etanólico de la especie Conyza bonariensis
Parámetro Resultados Unidades
Humedad 15,02 ± 2,17 g/100g
Cenizas 12,16 ± 0,43 g/100g
Solidos solubles 3,56± 0,21 Brix
pH 4,13 ± 0,17 …
Aspecto Liquido viscoso --
En la tabla 1 se puede observar los parámetros que nos permitió caracterizar al
extracto etanólico seco Conyza bonariensis un contenido de humedad que nos
permite su conservación y así como el alto contenido de cenizas que representa
el contenido de sales minerales del extracto.
Tabla 2. Tamizaje fitoquímico del extracto etanólico de la especie Conyza
bonariensis
Reacción Resultados Metabolito
Extracto etanólico
Gelatina +++
Taninos
FeCl3 ++
Compuestos fenólicos libres
Ninhidrina --
Aminoácidos libres
Shinoda +++
Flavonoides
Dragendorff --
Alcaloide
Hager --
Alcaloide
Mayer --
Alcaloide
Espuma ++
Saponinas
Borntrager ++
Antraquinonas
Rosenheim --
leucoantocianidinas
Lierberman Bourchard ++
Triterpenos y/o esteroides
Tabla 3. Actividad antioxidantes y compuestos relacionados
Parámetros Resultados Unidades
A.A FRAP 791 ± 14,2 µM de trolox/g extracto
A.A. ABTS 662 ± 25,7 µM de trolox/g extracto
A.A. DPPH IC50 0,82 ± 0,11 mg/mL
Polifenoles totales 167,2 ± 9,15 µg EAG/g extracto
Flavonoides 413 ± 32,5 µg QE/g extracto
IC50 Equivalente a 0,45 mM de trolox. EAG= equivalente de acido gálico. QE=
quercetina equivalente.
En la tabla 3. se puede apreciar los resultados de la actividad en el método
FRAP cuyo mecanismo es en base a transferencia de electrones libres y presenta
el valor más alto expresado en µM de trolox; mientras que los métodos de DPPH y
ABTS intervienen ambos mecanismos (HAT Y SET) presenta valores más bajos, los
valores obtenido por los métodos de DPPH y FRAP se diferencia de lo reportado
por ESPINOZA et al (2020) para la fracción de acetato de etilo obtenido a partir
del extracto metanolico de las hojas de la especie; la considerable capacidad
antioxidante del extracto es concordante con el alto contenido de compuestos de
naturaleza fenólicos y en especial de flavonoides. En la tabla 2 se puede
apreciar los resultados de la actividad en el método FRAP cuyo mecanismo es en
base a transferencia de electrones libres presenta el valor es más alto
expresado en µM de trolox; mientras que los métodos de DPPH y ABTS intervienen
ambos mecanismos (HAT Y SET) presenta valores más bajos, la considerable
capacidad antioxidante del extracto es concordante con el alto contenido de
compuestos de naturaleza fenólicos y en especial de flavonoides.
Tabla 4. Contenido de minerales en el extracto etanólico de la especie Conyza
bonariensis “venadillo
Parámetros Resultados Unidades
Calcio 41.6 ± 2,51 mg/100g
Magnesio 319,2 ± 12,71 Mg/100g
Hierro 7,35 ± 0,51 mg/100g
Cinc 0,54 ± 0,11 mg/100g
Cobre 13,3 ± 1,09 mg/100g
Potasio 3901,3 ± 32,1 mg/100g
Cadmio N.D. mg/100g
Cromo N.D mg/100g
Plomo N.D. mg/100g
En la tabla 4 se puede observar un aporte apreciable de magnesio mineral que
actúa como cofactor de muchas enzimas importantes en diversos funciones
fisiológicas atribuyéndosele también capacidad antioxidante Evidencias
experimentales muestran que el tratamiento con Sulfato de magnesio en pacientes
intoxicados con fosfuro de aluminio, conduce a una disminución significativa en
los niveles de malondialdehído a las 120 minutos de haber iniciado el
procedimiento, normalizando sus niveles a las 48-72h. De igual manera, los
niveles de glutatión reducido comienzan a recuperarse entre las 12 y las 24h,
completándose su recuperación a las 48-72h de iniciado el tratamiento con
Sulfato de magnesio (ABAD et al 2005); otro mineral de contenido apreciable a
tener en cuenta es el alto contenido de potasio ya que Un número limitado de
enzimas demanda la presencia de este mineral para su actividad. La activación de
Na+/K+-ATPasa demanda la presencia de sodio y potasio. La presencia de potasio
también es necesaria para la actividad del piruvato quinasa (SHENG et al 2000);
también es apreciable el nivel del cobre, un cofactor esencial para las
reacciones de oxidación y reducción que implican oxidasas que lo contienen. Las
enzimas de cobre regulan algunas vías fisiológicas, la habilidad del cobre para
aceptar y donar electrones fácilmente revela la importancia de este mismo en las
reacciones de oxidación y reducción (redox) y la actividad de barrido de
radicales libres (Uauy, et al 1998). La ausencia de metales pesados como cadmio,
plomo, cromo nos permiten sugerir que los extractos de esta especie vegetal son
apropiado para el uso de preparados terapéuticos.
Conclusões
Las propiedades atribuidas por la medicina popular a las especies Conyza
bonariensis venadillo podría tener una relación directa con los metabolitos
secundarios implicados con la propiedad antioxidante significativa determinada y
en acción sinérgica con el contenido de ciertos minerales.
Agradecimentos
Al Instituto de Investigación del Vicerrectorado de Investigación de la
Universidad Nacional San Luis Gonzaga y al laboratorio Certilab SAC pero las
facilidades para las realización de los diversos análisis de este estudio,
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