Autores
Cavalcante, L.J.C. (UECE) ; Nascimento, A.C.O. (UECE) ; Oliveira, M.S.C. (UECE) ; Alves, D.R. (UECE) ; Morais, S.M. (UECE)
Resumo
Algumas plantas silvestres vem ganhando interesse da comunidade científica
devido ao alto poder antioxidante que apresentam. O jambo vermelho (L.) Merryl &
Perry, pertencente a família myrtaceae, é uma planta originária da Malásia.
Neste trabalho foram utilizados os radicias livre DPPH e ABTS
para avaliação antioxidante. A atividade inibitória da enzima
acetilcolinesterase (AChE) foi aferida em placas de 96 poços de fundo chato
utilizando leitor Elisa BIOTEK, modelo ELX 800, software “Gen5 V2.04.11”. de
acordo com os resultados obtidos o extrato apresentou excelenete atividade
antioxidante, bem como antiacetilcolinesterase. Assim nossos objetivos foram
atingida com êxito e a pesquisa irá se aprofundar nas determinação
farmacológicas desse futuro produto natural.
Palavras chaves
JAMBO; ANTIOXIDANTE; ACETILCOLINESTERASE
Introdução
O jambo-vermelho, é um fruto de uma espécie de Jambeiro, Syzygium malaccenses. E
pertence à família Myrtaceae, que inclui também a goiaba, a pitanga, o jamelão,
a jabuticaba e o eucalipto. São frutos piriformes (em forma de pêra), com casca
lisa e cerosa, rosada, esbranquiçada, amarela ou laranja-amarelada, polpa
consistente e branca, e uma ou mais sementes de formato esférico no seu
interior (Kurosawa, 2016). Um grande número de doenças têm sido relacionadas com
o stress oxidativo e geração de radicais livres como câncer, envelhecimento,
aterosclerose, isquemia, e doenças neuro-degenerativas como mal de Parkinson e
de Alzheimer. Antioxidantes primários incluem os compostos fenólicos
poliidroxilados como ésteres do ácido gálico, flavonóides e os fenóis com
impedimento estrutural (t-butil-hidroxianisol BHA, t-butil-hidroxitolueno BHT,
t-butil-hidroquinona TBHT e Tocoferóis). Atuam bloqueando a ação dos radicais
livres, convertendo-os em produtos estáveis pela doação de hidrogênio ou
elétrons, além de atuarem nas reações com os radicais lipídicos, formando
complexo antioxidante-lipídio (Guerra, 2001). A eficiência de um antioxidante é
determinada pelos grupos funcionais presentes e pela posição que ocupam no anel
aromático, bem como, pelo tamanho da cadeia desses grupos.
A acetilcolinesterase (AChE) é uma enzima cuja ação é crucial na propagação do
impulso nervoso. A AChE inativa a ação do neurotransmissor acetilcolina
hidrolisando-o em acetato e colina. a doença de Alzheimer (DA), complexa e
progressiva doença neurodegenerativa multifatorial, atingindo primordialmente a
população idosa com mais de 65 anos de idade, (Adams et al., 2007).
Material e métodos
As cascas foram secas à 29°C em uma estufa e depois imersas em Hexano por 14
dias. Todo os testes foram realizados usando o extrato hexânico de cascas de
jambo-vermelho (Syzygium jambos).
A atividade antioxidante foi aferida em placas de 96 poços de fundo chato
utilizando leitor Elisa BIOTEK, modelo ELX 800, software “Gen5 V2.04.11”,
baseando-se na metodologia descrita por (Re et al., 1999). A solução ABTS + • (7
mM, 5 mL) foi misturada com 88 μl de persulfato de potássio (140 mM). A mistura
foi agitada e mantida no escuro à temperatura ambiente durante 16 h. Então, 1 ml
desta solução foi adicionado a 99 ml de etanol. Em placas de 96 poços, foram
utilizadas as seguintes soluções por poço: 300 µL de solução de ABTS e 3 µL da
amostra de extrato dissolvida em metanol. A absorbância foi aferida a 630 nm até
o total de 10 minutos de incubação. Em placas de 96 poços, foram utilizadas as
seguintes soluções por poço: 180 µL de solução metanólica de DPPH (2,2-difenil-
1-picrilhidrazil), 20 µL da amostra de extrato dissolvida no solvente de
extração da amostra e diluída 10 vezes para obter concentração final de 0,2
mg.mL-1.A absorbância foi aferida a 490 nm até o total de 60 minutos de
incubação.
A atividade inibitória da enzima acetilcolinesterase (AChE) foi aferida em
placas de 96 poços de fundo chato utilizando leitor Elisa BIOTEK, modelo ELX
800, software “Gen5 V2.04.11”. Em placas de 96 poços, foram utilizadas as
seguintes soluções por poço: iodeto de acetiltiocolina (15 mM), 5,5’–ditiobis-
[2-nitrobenzóico] na solução Tris/HCL (3 mM, DTNB ou reagente de Ellman),
Tris/HCL (50 nM, pH=8, com 0,1% de albumina sérica bovina (BSa) (Rhee et al.
2001, Trevisan et al. 2003).
A absorbância foi aferida em 405 nm.
Resultado e discussão
De acordo com a tabela 01 que mostra os resultados da avaliação antioxidante
frente
aos radicais livres DPPH e ABTS, nossos extratos se mostraram eficazes, já que o
IC 50 deles de 16,15 microgramas por ml é um resultado de relativa atividade
antioxidante destes extratos (Tabela 01). Já a atividade
antiacetilcolinesterase,
mesmo apresentando uma boa atividade antioxidante, mas comparado com o padrão
que
foi a Fisostigmina (Eserina) (Curva de diluição a partir de 2mg.mL-1), os
resultados apesar de mostrarem baixa concentração de amostra versus ação
inibitória (Tabela 02), iremos testar outras concentrações até chegar em uma
dosagem mais eficiente.
Conclusões
O estudo preliminar do potencial antioxidativo e iniitório da Acetilcolinesterase
mostraram-se satisfatório. Em análise posteriores ainda precisamos adequar a
dosagem para termos as atividades com uso das menores concentrações possíveis de
extrato. Visto seu poder antioxidante bem eficaz.
Agradecimentos
Ao Laboratório de Química de Produtos Naturais - LQPN, da UECE pela realização dos
testes.
Referências
ADAMS, M.; GMUEDNER, F.; HAMBURGER, M. Plants traditionally used in age related brain disorders - A survey of ethnobotanical literature. Journal of Ethnopharmacology, v.113, p.363-81, 2007.
GUERRA E. J. I. (2001). Oxidative stress, diseases and antioxidant treatment. Anales Medicina Interna, 18: 326-335.
KUROSAWA, C. Jambo-Vermelho. Disponível em: http//redeglobo.com/globorural. Acesso 290 em: 25 dezembro. 2016.
RE R, P. N., PROTEGGENTE A, PANNALA A, YANG M, RICE-EVANS C. Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay. Free Radic Biol Med. 1999 May;26(9-10):1231-7. doi: 10.1016/s0891-5849(98)00315-3. PMID: 10381194.
RHEE, I.K. et al. Screening for acetylcholinesterase inhibitors from Amaryllidaceae using silica gel thin-layer chromatography in combination with bioactivity staining. Journal of Chromatography, v.915, p.217-23, 2001.
TREVISAN, M.T.S.; MACEDO, F.V.V. Seleção de plantas com atividade anticolinesterase para tratamento da doença de Alzheimer. Química Nova, v.26, n.3, p.301-4, 2003.
