Autores
Miranda, L.M. (INSTITUTO FEDERAL DE BRASÍLIA) ; Passos, G.H. (INSTITUTO FEDERAL DE BRASÍLIA) ; da Paz, V.G.F. (INSTITUTO FEDERAL DE BRASÍLIA) ; Aquino, E.N. (INSTITUTO FEDERAL DE BRASÍLIA) ; da Silva, R.A. (INSTITUTO FEDERAL DE BRASÍLIA) ; Silva, M.G. (INSTITUTO FEDERAL DE BRASÍLIA)
Resumo
A espécie Pleroma glanulosum (Desr.) D. Don (Melastomataceae) é uma planta
nativa da mata atlântica brasileira caracterizada pelas flores com tonalidades
roxo e rosa. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana
de frações orgânicas de folhas de quaresmeira, por meio de antibiograma e
determinação de concentração inibitória mínima. Os resultados dos ensaios
propostos mostraram que as frações preparadas em hexano e em metanol apresentaram
potencial inibitório contra S. aureus, P. aeruginosa e E.
coli, sendo a fração polar mais expressiva contra a cepa de S. aureus.
Os resultados alcançados permitem inferir acerca do potencial antimicrobiano das
frações, especialmente da fração metanólica contra cepa de S.aureus.
Palavras chaves
quaresmeira; antibiograma; CIM
Introdução
A química medicinal contribui para a identificação de novas substâncias com
atividades biológicas. Estudos desta área englobam desde o planejamento racional
de estruturas bioativas a estudos das interações com os sistemas biológicos,
passando pelas fases de produção de extratos e obtenção de frações, isolamento
da substância pura e elucidação estrutural (MIKOVISK et al., 2018). Pleroma
granulosum (Melastomataceae), conhecida como quaresmeira, é uma planta
nativa da mata atlântica brasileira. Estudos químicos demonstraram que a
quaresmeira é capaz de produzir uma variedade de metabólitos secundários, como
flavonoides, terpenos, saponinas, taninos e benzoquinonas. Além disto,
estruturas como antocianidinas, petunidinas, malvidinas e pelargoninas foram
identificadas em extratos das folhas de quaresmeira (BARNABY, REID, WARREN,
2016). O desenvolvimento de novos fármacos a partir de plantas medicinais muitas
vezes se utiliza do conhecimento e uso popular de determinadas espécies, cujas
plantas servem de modelos experimentais para a identificação destas estruturas.
O Brasil possui uma das mais ricas biodiversidades do mundo e este fato pode ser
vinculado a uma relevante fonte de substâncias biologicamente ativas. O objetivo
deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana de extratos e frações
orgânicas de folhas de T. granulosa. O estudo de substâncias que exibem
potencial antimicrobiano é fundamental, principalmente devido ao aumento da
resistência microbiana aos agentes já conhecidos e comumente utilizados, sendo
este fato um grande propulsor de pesquisas desta área.
Material e métodos
Folhas de Pleroma granulosum foram coletadas na cidade de Catalão, região
sudeste do estado de Goiás (coordenadas: Latitude -18,1650 e Longitude
-47,9250). A identificação da espécie foi feita pelo Jardim Botânico de Brasília
(Voucher HEPH 37656). Após lavagem e secagem das folhas, 51,4215g foram levadas
à extração por percolação, utilizando Hexano, Acetato de Etila e Metanol, em
sequência. Após o processo extrativo, os solventes foram eliminados em rotavapor
a pressão reduzida, obtendo-se as frações em hexano (FrH), em acetato de etila
(FrAc) e em metanol (FrM). Para avaliação da atividade antimicrobiana das
frações obtidas utilizou-se o método de difusão em ágar (antibiograma). Os
testes foram realizados com cepas de Staphylococcus aureus (NEWP 0023) e
Escherichia coli (NEWP0018) fornecidas pela Newprov e Pseudomonas
aeruginosa (ATCC 27853) fornecida pela CentralLab, devidamente padronizadas.
As frações foram preparadas em DMSO 20% e concentração final de 1mg/100 µL,
tendo-se como padrões soluções de DMSO 20% (veículo) e gentamicina. A análise
dos resultados do antibiograma foi realizada por meio da medida dos halos de
inibição das amostras e do controle positivo. Para a cepa de Staphylococcus
aureus realizou-se a determinação da concentração inibitória mínima,
considerando os resultados preliminares do antibiograma. Para tanto, as frações
FrH, FrAc e FrM foram diluídas, de forma seriada e em triplicada, em placa de
microtitulação, em diferentes concentrações. Tratamento similar foi adotado para
os controles positivo e negativo. A placa de microtitulação foi incubada por 40h
a 37ºC. Após o período delimitado, foi realizada a leitura da placa em
espectrofotômetro, com comprimento de onda ajustado para 620 nm.
Resultado e discussão
A extração de substâncias presentes nos vegetais envolve atenção na execução dos
experimentos, principalmente quanto à escolha dos solventes extratores.
Considerando que os metabólitos secundários das plantas encontram-se no interior
de células especializadas, a correta escolha do solvente pode determinar o
rendimento da extração. Os rendimentos observados nas extrações propostas neste
trabalho foram 4,39%; 1,47% e 5,06% para as frações FrH, FrAc e FrM,
respectivamente. A técnica utilizada neste trabalho foi o da percolação, cuja
vantagem é o aumento potencial do rendimento, uma vez que este processo permite
a remoção do extrato de maneira controlada e constante. Quanto a atividade
antimicrobiana, os resultados do antibiograma mostraram que as frações FrH e FrM
apresentaram potencial inibitório contra o crescimento das bactérias S.
aureus (Gram-positiva), P. aeruginosa e E. coli (Gram-
negativas), sendo a fração FrM mais expressiva para a cepa de S. aureus
utilizada. Para determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM), foram
escolhidos os extratos que apresentaram os melhores resultados no antibiograma,
sendo desenvolvido com as frações FrM e FrH contra a bactéria S. aureus.
A CIM variou entre de 0,01 mg/μL e 0,003 mg/μL para FrH e 0,01 mg/μL a 0,005 mg/
μL para FrM. Resultados semelhantes foram descritos por Menezes-Filho et
al. (2021) no que se refere à atividade antimicrobiana dos extratos da
quaresmeira. Os resultados obtidos a partir da CIM nos permitem verificar a
faixa de concentração necessária para inibir o desenvolvimento da S.
aureus. Ainda assim, é valido ressaltar que esses estudos são primordiais
para o screening de novos fármacos e no desenvolvimento de novos
medicamentos.
Conclusões
Este estudo apresentou resultados importantes sobre a atividade antimicrobiana das
frações orgânicas obtidas da quaresmeira. Por meio dos resultados apresentados
neste trabalho, novas abordagens e planejamento de métodos cromatográficos para o
isolamento e avaliação de atividade biológica das substâncias puras poderão ser
realizados, já que há evidências experimentais da presença de substâncias ativas
com atividade antimicrobiana em frações orgânicas em hexano, acetato de etila e em
metanol.
Agradecimentos
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) – Programa de
Iniciação Científica (PIBIC) – IFB/CNPq
Referências
BARNABY, A. G.; REID, R.; WARREN, D. Antioxidant activity, total phenolics and fatty acid profile of Delonix regia, Cassia fistula, Spathodea campanulata, Senna siamea and Tibouchina granulosa. J Anal Pharm Res, v. 3, n. 2, p.56, 2016.
DE MENEZES FILHO, A. C. P.; VENTURA, M. V. A.; DE SOUZA CASTRO, C. F. Floral extract of Tibouchina granulosa (Desr.) Cogn. Phytochemistry prospection and antibacterial activity. Ipê Agronomic Journal, v. 5, n. 1, p. 1-9, 2021.
MIKOVSKI, D. et al. Química Medicinal E A Sua Importância No Desenvolvimento De Novos Fármacos. Revista Saúde e Desenvolvimento, v.12, n.13, p.29-43, 2018.
